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一种基因工程表达QX型鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原的制备方法与应用
| 专利名称： | 一种基因工程表达QX型鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原的制备方法与应用 |
| 摘要： | 本发明属于生物技术领域，涉及一种基因工程表达QX型鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原的制备方法与应用。本发明公开了序列如SEQ ID NO.9所示的S1‑E蛋白作为检测IBV抗体的抗原的应用。公开了用于检测IBV抗体的检测试剂盒，还公开了基因工程表达QX型鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原的制备方法。本发明提供的基因工程重组QX型IBV S1蛋白抗原S1‑E可与QX型IBV阳性血清发生特异结合，与非QX型IBV阳性血清交叉反应较弱，可用于QX型IB疫苗免疫抗体的监测与评估。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 扬州大学 |
| 发明人： | 张小荣;王月欣;吴艳涛;郭梦娇;张成成;曹永忠 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-07-25T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-10-25T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910674813.1 |
| 公开号： | CN110376385A |
| 代理机构： | 南京知识律师事务所 |
| 代理人： | 卢亚丽 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 225009 江苏省扬州市大学南路88号 |
| 主权项： | 1.S1-E蛋白作为检测IBV抗体的抗原的应用，所述S1-E蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO.9所示。 2.一种用于检测IBV抗体的检测试剂盒，其特征在于，包括包被有S1-E重组蛋白纯化复性产物的酶标板、阳性和阴性对照、HRP标记的兔抗鸡IgG、样品稀释液、显色液以及洗涤液，所述S1-E的氨基酸序列如SEQ ID NO.9所示。 3.根据权利要求2所述的检测试剂盒，其特征在于，所述包被有S1-E重组蛋白的ELISA酶标板，是通过将纯化复性的S1-E蛋白原核表达产物包被于96孔酶标板而制备。 4.一种基因工程表达QX型鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白抗原的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：根据S1-E的氨基酸序列确定对应的IBVQXL87株S1基因编码区序列为SEQID NO.14；根据该基因序列设计引物将该基因片段PCR扩增并克隆入pET-32a(+)载体，将重组表达载体进一步转化到感受态BL21(DE3)大肠杆菌中进行诱导表达；通过Ni-NTA亲和层析法从重组菌中纯化获得重组蛋白命名为S1-E。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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