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偶联丙酮酸氧化酶测定同型半胱氨酸（Hcy）的方法及测定试剂盒
| 专利名称： | 偶联丙酮酸氧化酶测定同型半胱氨酸（Hcy）的方法及测定试剂盒 |
| 摘要： | 本发明是用胱硫醚β‑合成酶和胱硫醚β‑分解酶，偶联丙酮酸氧化酶，测定同型半胱氨酸的方法。原理是：用三(2‑羧乙基)磷氯化氢，使氧化型同型半胱氨酸被转化成游离型同型半胱氨酸，在胱硫醚β‑合成酶的催化和丝氨酸反应生成L‑胱硫醚，L‑胱硫醚在胱硫醚β‑分解酶的催化下又生成同型半胱氨酸、氨和丙酮酸，丙酮酸在丙酮酸氧化酶的催化下生成过氧化氢，再进行Trinder反应显色。而反应过程中产生的同型半胱氨酸又回去参与反应，形成一个循环反应。本发明同时还可以做成同型半胱氨酸测定试剂盒。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江力耐得传动科技有限公司 |
| 发明人： | 李丰盛;倪建芬;车桃李 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-04-04T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-10-18T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810299069.7 |
| 公开号： | CN110346572A |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 312300 浙江省绍兴市上虞区百官街道城东工业区 |
| 主权项： | 1.一种测定同型半胱氨酸的方法，步骤如下： 1)、试剂一的反应： 用于清除样品中原有的丙酮酸； 2)、加入试剂二后，试剂二中的胱硫醚β-合成酶和胱硫醚β-分解酶开始反应，氧化显色剂生成红色的醌亚胺，在特定波长下检测吸光度，来计算同型半胱氨酸的含量； 3)、检测最终反应物在波长500～600nm吸光度，测算出同型半胱氨酸的含量。 2.根据权利要求1所述测定同型半胱氨酸的方法，其特征在于：被测样品与试剂的比例控制在1/50至1/100。 3.一种同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：包括试剂一和试剂二； 试剂一： 试剂二： 所述试剂一与试剂二的比为1/1到8/1。 4.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述缓冲液为甘氨酸盐、磷酸盐、三羟甲基氨基甲烷、2-吗啉乙磺酸、3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸、4-羟乙基哌嗪丙磺酸中的一种或多种，所述缓冲液pH为6.5～8.5。 5.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述防腐剂为叠氮化钠、ProClin-300、对羟基苯甲酸及酯类中的一种或多种。 6.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述稳定剂为小牛血清白蛋白，氨基酸，糖类衍生物、多元醇、黄素腺嘌呤二核苷酸中的一种或多种。 7.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述表面活性剂为吐温类聚乙二醇醚类或聚氧乙烯醚类非离子表面活性剂。 8.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述酶激活剂为Ca2+或Mg2+。 9.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述显色剂为4-氨基安替比林，苯酚类、苯胺类。 10.根据权利要求3所述同型半胱氨酸检测试剂盒，其特征在于：所述还原剂为三(2-羧乙基)磷盐酸盐、二硫苏糖醇、二硫赤鲜糖醇、β-巯基乙醇中的一种或多种。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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