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原文传递一种荧光探针及其制备方法、生物传感器及其构建方法和应用

专利名称：	一种荧光探针及其制备方法、生物传感器及其构建方法和应用
摘要：	本发明公开了一种用于荧光法检测2,6‑吡啶二羧酸浓度的荧光探针，包括金纳米簇粒子，其中掺杂有铕元素，所述荧光探针的粒径为1‑2nm。将稀土铕元素发光与金纳米簇稳定发光相结合，得到的铕掺杂金纳米簇荧光探针具有比率型发光的特点，消除了环境内置干扰，发光信号稳定，检测准确度高，灵敏度高，降低了检测限，检测范围广。本发明还提供了一种用于荧光法检测2,6‑吡啶二羧酸浓度的生物传感器，将铕掺杂金纳米簇荧光探针与标准曲线结合，可以简化后续的检测步骤，灵敏度高，准确度高，检测范围宽，无需借助其他精密贵重仪器。本发明还分别公开了荧光探针和生物传感器的制备方法，制作过程简单，容易操作，成本低，适合推广使用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	中南大学
发明人：	阳明辉;李晓庆;候轶
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910604761.0
公开号：	CN110346338A
代理机构：	长沙朕扬知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	郭蓓霏
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	410083 湖南省长沙市麓山南路932号
主权项：	1.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的荧光探针，其特征在于，包括金纳米簇粒子，其中掺杂有铕元素，所述荧光探针的粒径为1-2nm。 2.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)分别配制氯金酸溶液和硝酸铕溶液，混合均匀，得到含铕元素的反应体系； (2)在所述步骤(1)得到的反应体系内加入球蛋白，合成金纳米簇溶液，调节所述金纳米簇溶液的pH为碱性，在搅拌条件下剧烈反应，得到铕掺杂金纳米簇的荧光探针。 3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，氯金酸溶液和硝酸铕溶液的体积比为1︰1，质量浓度比为1︰1-2；所述氯金酸溶液的浓度为5-10mM，所述硝酸铕溶液的浓度为5-10mM。 4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，球蛋白为牛血清白蛋白，其浓度为50-100mg/mL，球蛋白加入过程中以1000r/min的速度剧烈搅拌并持续搅拌2-5min；调节所述金纳米簇溶液的pH为10-12，调节pH所用的试剂为氢氧化钠溶液，其浓度为1-2M。 5.根据权利要求2-4中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中，反应的温度为35-37℃，反应的时间为10-12h，搅拌转速为1000-1200r/min。 6.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的生物传感器，其特征在于，包括权利要求1所述或由权利要求2-5中任一项所述制备方法制备得到的荧光探针以及标准2,6-吡啶二羧酸浓度的标准曲线，所述标准曲线由所述荧光探针与不同浓度的标准2,6-吡啶二羧酸进行混合反应后通过荧光法测定、绘制得到。 7.一种用于荧光法检测2,6-吡啶二羧酸浓度的生物传感器的构建方法，其特征在于，包括如下步骤： A)将权利要求1所述或由权利要求2-5中任一项所述制备方法制备得到的荧光探针，与不同浓度的标准2,6-吡啶二羧酸混合进行特异性反应，构建检测2,6吡啶二羧酸的比率型荧光传感器； B)采用荧光法进行测定，得到不同浓度的标准2,6-吡啶二羧酸荧光光谱图； C)以各荧光光谱图中617nm与650nm处荧光强度的比值为纵坐标，标准2,6-吡啶二羧酸浓度为横坐标，绘制标准曲线。 8.根据权利要求7所述的构建方法，其特征在于，所述2,6-吡啶二羧酸的浓度分别为1μM，μM，10μM，15μM，20μM，25μM，30μM，35μM，40μM，45μM，50μM；所述荧光探针与标准2,6-吡啶二羧酸的体积比为1︰120-240。 9.根据权利要求7或8所述的构建方法，其特征在于，所述特异性反应的温度为25-30℃，时间为10-30min。 10.一种如权利要求6所述或由权利要求7-9中任一项所述构建方法得到的生物传感器的应用，其特征在于，采用所述的生物传感器检测2,6-吡啶二羧酸的浓度，检测的过程包括如下步骤：取待测2,6-吡啶二羧酸与所述荧光探针按体积比为1︰120-240进行混合反应，然后采用荧光法进行测定，得到相应荧光强度值，在所述的标准曲线中找到该荧光强度值所对应的2,6-吡啶二羧酸的浓度，即得待测2,6-吡啶二羧酸的浓度。
所属类别：	发明专利