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原文传递一种昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法

专利名称：	一种昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法
摘要：	本发明公开了一种昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，属于实验样品处理技术领域。本发明通过活体触角氯化镍或氯化钴浸染、活体触角和脑的显微分离、显色、固定、脱水、触角与脑透明化处理、触角姿态固定和显微拍照即可实现完整触角内神经纤维束的示踪。本发明解决了在不切片不破坏触角的条件下完整触角透明及其神经纤维束多角度可视化的难题，也使得能够在神经通路水平上直接观察触角内神经纤维束与脑的联接；本发明方法成本低廉、方法可靠、操作简便易行，重复性好，可直接获得触角内部神经结构的多维度的数据。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	云南;53
申请人：	云南大学
发明人：	曹军;郭凯飞;代曼;曹婵;刘一淼;杨洋;胡劭骥;叶辉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910624985.8
公开号：	CN110361239A
代理机构：	北京市盈科律师事务所
代理人：	罗东
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	650091 云南省昆明市翠湖北路2号
主权项：	1.一种昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于，具体步骤如下： (1)活体昆虫触角进行氯化镍溶液或氯化钴溶液浸染； (2)显微分离活体昆虫完整的触角和脑； (3)采用红氨酸溶液浸没昆虫触角和脑至昆虫触角和脑上神经纤维束被标记，吸除红氨酸溶液，再采用酒精清洗得到显色的昆虫触角和脑； (4)依次采用甲醛溶液A和甲醛溶液B固定显色后的昆虫触角和脑中的组织，再对昆虫触角和脑进行脱水处理； (5)将昆虫触角和脑浸入水杨酸甲酯中，在室温条件下处理1～12h； (6)调整和固定昆虫触角和脑的姿态，再进行显微拍照获取不同角度、不同放大倍率下触角内神经纤维束的图像信息。 2.根据权利要求1所述昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于：步骤(1)中氯化镍溶液或氯化钴溶液的质量浓度为1％～10％，设昆虫触角长度为n毫米，则浸染时间为n～n+5小时。 3.根据权利要求1所述昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于：步骤(3)中酒精为纯酒精。 4.根据权利要求1所述昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于：步骤(4)甲醛溶液A的质量浓度为5％，甲醛溶液B的质量浓度为10％，甲醛溶液A固定时间为10min，甲醛溶液B固定时间为10min。 5.根据权利要求1所述昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于：步骤(4)脱水处理的具体方法为依次采用质量浓度为70％、80％、90％、100％的酒精对昆虫触角和昆虫脑进行脱水处理，不同浓度的酒精脱水时间均为5min。 6.根据权利要求1所述昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于：步骤(6)中昆虫触角和昆虫脑的姿态固定采用小井装置，小井装置内设置石英砂。 7.根据权利要求6所述昆虫浅色触角内神经纤维束示踪的方法，其特征在于：石英砂为两种不同的尺寸；石英砂的粒径为样本最小尺寸的1/5-1/2，两种石英砂的质量比为1:(1～3)。
所属类别：	发明专利