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原文传递利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用

专利名称：	利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用
摘要：	本发明公开了一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法及其应用，利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法按照下述步骤进行：将Cd2+加入到Datko培养基上，得到含镉Datko培养基；将浮萍培养于得到的含镉Datko培养基上，培养24小时，得到浮萍植株；夹取浮萍植株，用A液清洗后，将所述浮萍植株放入离心管中，加入组织固定液固定所述浮萍植株15～20min；利用全景细胞多维系统分析检测，通过荧光对镉离子进行定位分析，根据荧光强度分析镉离子含量。本发明首创利用全景细胞多维系统检测水体中的镉离子，可在短时间内检测水体中有无镉离子，应用于水体镉污染检测，弥补了传统的镉离子测定方法的缺点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天津师范大学
发明人：	杨琳;韩玉洁;王苏桐
专利状态：	有效
申请日期：	2018-04-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-29T00:00:00+0800
申请号：	CN201810351106.4
公开号：	CN110389115A
代理机构：	天津创智天诚知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	李蕊;田阳
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	300387 天津市西青区宾水西道393号
主权项：	1.一种利用全景细胞多维系统检测水体镉离子的方法，其特征在于，按照下述步骤进行：步骤1，调整Datko培养基的PH至5.6～5.8，于100～105kPa、120～125℃下进行灭菌；所述Datko培养基如下：步骤2，将Cd2+加入到步骤1得到的Datko培养基上，得到含镉Datko培养基；步骤3，采集浮萍，将浮萍培养于步骤2得到的含镉Datko培养基上，培养24小时，得到浮萍植株，其中，培养条件为：温度18～25℃，光周期16～18小时/天，光强95～97μmol m-2s-1；步骤4，夹取步骤3得到的浮萍植株，用A液清洗后，将所述浮萍植株放入离心管中，加入组织固定液固定所述浮萍植株15～20min；其中，所述组织固定液如下：乙醇水溶液 85～95g/l 冰醋酸 95～100g/l 去离子水溶剂，其中，在所述乙醇水溶液中，乙醇的体积浓度为80～90％；所述A液如下：步骤5，在酶解温度为23～27℃的条件下，用组织酶解液在黑暗条件下酶解步骤4所得的浮萍植株25～30min，每间隔10～15min吹打混匀一次，得到悬浮的浮萍原生质体；所述组织酶解液如下：步骤6，通过离心对步骤5所得的浮萍原生质体清洗2～5次，每次清洗的过程为：用20～25℃的B液垂直打入浮萍原生质体所在离心管，以使浮萍原生质体悬浮，悬浮后进行离心，离心后移除上层清液；所述B液如下：步骤7，对浮萍原生质体清洗后，用B液重悬浮萍原生质体，并用移液枪吹打均匀；吹打均匀后，滴20μl Green AM，在黑暗条件下，于37～40℃染色15～20min；步骤8，按照步骤6所述清洗的过程清洗步骤7得到的浮萍原生质体2～5次；步骤9，利用全景细胞多维系统分析检测，通过荧光对镉离子进行定位分析，根据荧光强度分析镉离子含量。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在所述步骤1之前，制备Datko培养基母液，通过对所述Datko培养基母液进行稀释得到所述Datko培养基。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述B液的PH为7～8。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，在所述步骤1中，灭菌时间为20～25分钟。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，在所述步骤3中，所述A液的PH为7～8。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，在所述步骤6中，每次清洗3～5min，相对离心加速度或相对离心力为2000～2500×g。 7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述Datko培养基如下： 8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，组织固定液如下：乙醇水溶液 90g/l 冰醋酸 98g/l 去离子水溶剂。 9.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，组织酶解液如下： 10.如权利要求1～9中任意一项所述方法在定位、检测和跟踪镉离子中的应用。
所属类别：	发明专利