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原文传递一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法及装置

专利名称：	一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法及装置
摘要：	本发明公开一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法及装置，通过引入对照颗粒和探针，通过已知对照颗粒的浓度确定临床样品中小颗粒及浓度，同时通过探针标记能获得临床样品中小颗粒的来源等特性，达到同时获得临床样品中的特定小颗粒的特性和信息，该信息可进一步用于临床诊断和疗法监测。方法简单，效果良好，并且相较于现有技术，本发明装置成本低廉，不受颗粒的浓度等因素限制，操作简单方便，适应于在临床环境中使用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	赛莱克斯(深圳)科技有限公司
发明人：	李兴祥
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-10-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201910619359.X
公开号：	CN110376105A
代理机构：	北京君泊知识产权代理有限公司
代理人：	李丹
分类号：	G01N15/00(2006.01);G;G01;G01N;G01N15
申请人地址：	518000 广东省深圳市盐田区海山街道深盐路2028号大百汇生命健康产业园2号楼901
主权项：	1.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：包括步骤如下： 1）：首先将含有待测颗粒的临床样品与检测试剂接触温育；所述检测试剂含有至少一个用于标记样本中待测颗粒的探针；然后再与结合有探针的对照微粒混合形成混合物； 2）：将步骤1）中的混合物加载到设有观察窗口的反应容器中，观察和/或拍摄照片记录； 3）：根据步骤2）中观察和拍摄记录的结果，确定样品中待测颗粒的特性和浓度，并将该特性和浓度信息应用于临床诊断或疗法监测。 2.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：包括步骤如下： a）：将含有待测颗粒的临床样品与检测试剂接触温育；所述检测试剂含有用于标记样本中待测颗粒的第一探针，所述第一探针能与待测颗粒上指示其来源的第一标记物相结合；然后再与对照颗粒混合获得第一混合物，所述对照微粒含有被第二标记物包裹的第二探针；所述第二标记物类似于第一标记物； b）：将步骤a）中获得的第一混合物与涂有第一结合配偶体的磁性颗粒接触进一步培育，获得第二混合物；所述第一结合配偶体可特异性地与待测颗粒上的第一标记物和对照颗粒上的第二标记物相结合； c）：将步骤b）中获得第二混合物加载到设有观察窗口的反应容器中，并通过能够产生磁场的设备将磁性颗粒以及被磁性颗粒所捕获的待测颗粒和对照颗粒一起吸引且固定到反应容器观察窗口的内表面，以便观察和/或拍摄照片记录； d）：根据步骤c）中观察和拍摄的记录结果，确定样品中待测颗粒的特性和浓度，并将该特性和浓度信息应用于临床诊断或疗法监测。 3.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：包括步骤如下： S1：将含有待测颗粒的临床样品与检测试剂接触温育；所述检测试剂含有用于标记样本中待测颗粒的第一探针和第三探针，所述第一探针能与待测颗粒上指示其来源的第一标记物相结合；然后与对照颗粒混合形成混合物，所述对照颗粒结合有第二探针，所述第二探针被对照微粒的第二标记物包裹；所述第二标记物类似于第一标记物； S2：将步骤S1中的混合物加载到设有观察窗口的反应容器中，并观察和/或拍摄照片记录； S3：根据步骤S2中观察和拍摄记录的结果，确定样品中待测颗粒的特性和浓度，并将该特性和浓度信息应用于临床诊断或疗法监测。 4.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述的临床样品预先经过完整的人体细胞去除处理，所述的待测颗粒包括活细胞分泌的细胞外囊泡、死细胞的细胞碎片或聚集体。 5.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：还包括稀释步骤，该稀释步骤为临床样品与检测试剂接触培育后稀释，然后与对照颗粒混合。 6.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述探针均为荧光探针或者能够化学发光的酶，且第一、第二和第三探针具有可区分的发光波长。 7.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述对照颗粒为非磁性粒子，其直径尺寸包括50～100nm，50～250nm，50～500nm，50～1000nm和500～2000nm。 8.根据权利要求2所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述的磁性颗粒上的第一结合配偶体包括抗体、核酸、肽、适体、拟肽、配体、受体或其组合。 9.根据权利要求2或8所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述磁性颗粒的直径尺寸包括0.5～3.5μm，0.5～2μm和0.5～1.5μm。 10.根据权利要求2或3所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述第一探针包括对核酸或脂质膜具有结合亲和力的探针，用于指示待测颗粒是否源自死细胞或正在死亡的细胞。 11.根据权利要求3所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述第三探针用于确定待测颗粒的特性，即确定待测颗粒是否带有特定的标记物。 12.根据权利要求1～3任意一项所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的方法，其特征在于：所述的临床诊断包括肝中毒诊断、急性肾损伤诊断、心脏病发作诊断和败血症性休克诊断；所述的疗法监测包括化疗监测、细胞疗法监测、免疫疗法监测和放射疗法监测。 13.一种用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：包括反应容器（4），位于反应容器（4）观察窗口一侧的图像记录器（11），以及与图像记录器（11）连接的计算和数据存储装置（13），所述反应容器（4）用于盛放权利要求1～3任意一项所述的含有待测颗粒的混合物。 14.根据权利要求13所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：还包括用于引起待测颗粒（1）和对照颗粒（2）中的探针产生荧光的激发光源（7）。 15.根据权利要求13或14所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：所述图像记录器（11）与反应容器（4）观察窗口之间设有滤光器（10），所述的滤光器（10）只允许探针产生的荧光通过。 16.根据权利要求15所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：所述图像记录器（11）下方设有能够产生磁场的设备（12），以便将权利要求2中所述的磁性颗粒（3）以及被磁性颗粒（3）所捕获的待测颗粒（1）和对照颗粒（2）一起吸引并固定到反应容器（4）观察窗口的内表面，利于观察和/或拍摄照片。 17.根据权利要求13所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：所述反应容器（4）观察窗口的两侧均设有棱镜（14），且设有图像记录器（11）一侧的棱镜（14）位于反应容器（4）观察窗口和图像记录器（11）之间。 18.根据权利要求17所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：所述反应容器（4）观察窗口和图像记录器（11）之间的棱镜（14）与反应容器（4）观察窗口之间设有浸油层（15）。 19.根据权利要求18所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：所述图像记录器（11）为全内反射荧光显微镜。 20.根据权利要求16所述的用于确定临床样品中小颗粒特性和浓度的装置，其特征在于：所述图像记录器（11）为基于电荷耦合器件和互补金属氧化物半导体的相机。
所属类别：	发明专利