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原文传递在线渗析-双抑制离子色谱法测定尿液中六种离子的方法

专利名称：	在线渗析-双抑制离子色谱法测定尿液中六种离子的方法
摘要：	本发明公开了一种在线渗析‑双抑制离子色谱法测定尿液中六种离子的方法，其包括以下步骤：(1)向尿液加入与其体积比为1:(3.5‑4.5)的乙腈，离心处理使尿液中的蛋白沉淀；吸取上清液再分别用有机相及无机相的针式过滤器过滤；(2)将步骤1处理好的样品上机进行检测，选用Metrosep A Supp 7色谱柱，碳酸钠和异丙醇混合溶液作为淋洗液；采用0.4‑0.8mL/min的流速进行分离。采用本发明方法能够对尿液中六种阴离子同时进行检测，操作简单，检测所需时间短约半小时即可完成；各离子分离度分离度＞1.5；各离子线性关系良好；6种离子的检出限和方法检测限分别在1.50‑12.0μg/L和15.0‑120μg/L之间。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	南方医科大学
发明人：	沈梅;龚若眉;王颖
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910614414.6
公开号：	CN110412185A
代理机构：	广州新诺专利商标事务所有限公司
代理人：	周端仪
分类号：	G01N30/14(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510515 广东省广州市白云区沙太南路1023号-1063号
主权项：	1.一种在线渗析-双抑制离子色谱法测定尿液中六种离子的方法，其特征在于包括以下步骤： (1)样品前处理：收集正常人中段尿液，向尿液加入与其体积比为1:(3.5-4.5)的乙腈，置于离心机离心，使尿液中的蛋白沉淀；吸取上清液，再分别用有机相及无机相的针式过滤器过滤，得到处理好的样品； (2)将步骤(1)处理好的样品上机进行检测，工作条件为：选用Metrosep A Supp 7色谱柱进行检测，选用碳酸钠和异丙醇混合溶液作为淋洗液；采用0.4-0.8mL/min的流速进行分离。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，尿液处理前或处理后，存放于在冰箱，且在一周内用完。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)中，按体积比尿液：乙腈：去离子水＝1:(3.5-4.5):(4.5-5.5)的比例混合，摇匀。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步骤(1)中的置于离心机离心，用12000-14000r，15-25℃的条件离心8-15min，使尿液中的蛋白沉淀。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的步骤(1)中所述针式过滤器采用0.22μm孔径的针式过滤器。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(1)不使用C18小柱纯化上清液。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，淋洗液采用3.2-4mmol/L碳酸钠和体积比为12-15％异丙醇的混合溶液。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤(2)中，采用Metrosep A Supp7色谱柱和MetrosepRP2/3.5保护柱，柱箱温度为45℃。 9.根据权利要求1-8任一权利要求所述的方法，其特征在于还包括：在与步骤(2)相同的工作条件下，进行亚氯酸根离子、亚硝酸根离子、溴离子、氯酸根离子、硝酸根离子和硫酸根离子混合标准曲线的绘制；最后对步骤(2)检测所得工作曲线根据保留时间定性，根据色谱峰面积用外标法计算被测目标物的含量。 10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：所述混合标准曲线的绘制步骤为：分别移取亚氯酸根离子、亚硝酸根离子、溴离子、氯酸根离子、硝酸根离子和硫酸根离子标准溶液于50mL容量瓶内，定容，配制成混合标准工作溶液，配置后浓度分别为SO42-为0.2，0.5，1，5，10，20，40mg/L，ClO2-、NO2-、Br-、ClO3-、NO3-为0.2，0.4，1，2，5，10，20mg/L；在设定的仪器工作条件下从低浓度到高浓度依次进样，以离子浓度mg/L为横坐标，以对应的色谱峰面积μS/min为纵坐标，绘制标准工作曲线；所述的计算被测目标物的含量方法为：以质量分数表示 Wi＝(ci-co)V (1) 式中： Wi—被测目标物质量分数，单位为微克每毫升mg/L； ci—从工作曲线查得的试样溶液中被测目标物的浓度，单位为微克每毫升mg/L； co—从工作曲线查得的空白溶液中被测目标物的浓度，单位为微克每毫升mg/L； V—试样溶液的稀释倍数；结果取两次测定结果的算术平均值。当结果大于等于1.0mg/L时，保留三位有效数字；当结果小于1.0mg/L时，保留两位有效数字。
所属类别：	发明专利