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原文传递一种细胞蜡块定型固定板及用其制作细胞蜡块的方法

专利名称：	一种细胞蜡块定型固定板及用其制作细胞蜡块的方法
摘要：	本发明公开了一种细胞蜡块定型固定板及用其制作细胞蜡块的方法，属于细胞病理学实验方法技术领域，本发明提供的定型固定板可以实现对细胞沉淀物的良好塑型固定，而且该器具结构简单、使用方便，实验结果证实，采用本发明提供的方法和器具制备的细胞蜡块，细胞沉淀物凝结紧密，在后续操作中不易出现散裂、破碎的现象。本发明提供的细胞蜡块制作方法简单，使得细胞沉淀物能以大致规整的形态被包埋于石蜡块中。本发明很好地解决了传统细胞蜡块制备方法中细胞沉淀物凝结效果不好，容易在后续操作中碎裂、导致细胞蜡块制作失败的缺点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	西安交通大学
发明人：	张明娟;郭睿;杨军;赵世平;靳耀锋;李宗芳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910533208.2
公开号：	CN110411813A
代理机构：	西安通大专利代理有限责任公司
代理人：	范巍
分类号：	G01N1/36(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	710049 陕西省西安市咸宁西路28号
主权项：	1.一种细胞蜡块定型固定板，其特征在于，包括定型固定板(1)，在定型固定板(1)上开设有若干定型固定孔(2)；定型固定孔(2)为柱形孔，底部平整或底部呈U型，用于盛装细胞沉淀物；定型固定孔(2)的直径、孔深均可调。 2.根据权利要求1所述的细胞蜡块定型固定板，其特征在于，所述定型固定孔(2)在定型固定板(1)上呈阵列分布。 3.根据权利要求1所述的细胞蜡块定型固定板，其特征在于，所述定型固定孔(1)的直径为3～10mm，深度为5～15mm。 4.一种细胞蜡块的制作方法，其特征在于，该方法基于权利要求1～3中任意一项所述的细胞蜡块定型固定板实现，包括以下步骤： 1)样本前处理将待制备的样本液体静置，获得细胞沉淀，离心处理，去上清液获得细胞沉淀物，将该细胞沉淀物转移至定型固定板(1)上开设的定型固定孔(2)中； 2)添加增稠剂根据步骤1)获得的细胞沉淀物的体积，按照1：0.5～1的体积比，向细胞沉淀物所在的定型固定孔(2)中加入水性增稠剂蛋白水溶液，充分混匀； 3)制作细胞蜡块向添加有水性增稠剂蛋白水溶液的定型固定孔(2)中加入95％酒精，静置处理，直至观察细胞沉淀物凝结成团，然后用擦镜纸或非脂溶性透水膜包裹，置于包埋盒中进行固定处理，最后将固定好的细胞沉淀物样本经脱水、透明、浸蜡、石蜡包埋处理，制得细胞蜡块。 5.根据权利要求4所述的细胞蜡块的制作方法，其特征在于，步骤2)中，水性增稠剂蛋白水溶液是将0.2～5g水性增稠剂和5～10g辅助蛋白溶于100mL PBS缓冲液中配制而成。 6.根据权利要求4所述的细胞蜡块的制作方法，其特征在于，所述水性增稠剂为黄原胶、藻蛋白酸钠、果胶、藻蛋白酸丙二酯、羧甲基纤维素、阿拉伯树胶和瓜尔豆胶中的一种或几种。 7.根据权利要求4所述的细胞蜡块的制作方法，其特征在于，所述辅助蛋白采用卵清蛋白或牛血清白蛋白。 8.根据权利要求4所述的细胞蜡块的制作方法，其特征在于，步骤3)中，根据含有水性增稠剂蛋白水溶液的细胞沉淀物的体积，按照1:5～10的体积比，缓慢加入95％酒精，静置10～15分钟进行预固定。 9.根据权利要求4所述的细胞蜡块的制作方法，其特征在于，步骤3)中，盛有10％中性福尔马林固定液的固定缸内固定处理4～24小时。 10.根据权利要求4所述的细胞蜡块的制作方法，其特征在于，还包括将获得的细胞蜡块切片处理制得石蜡切片的操作；所得石蜡切片，用于观察细胞结构和检测特异性分子靶标，或用于提取蛋白、核酸类分子进行相应的检测。
所属类别：	发明专利