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原文传递一种乳酸检测试剂及其检测方法

专利名称：	一种乳酸检测试剂及其检测方法
摘要：	本发明公开了一种乳酸检测试剂及其检测方法，检测试剂，包括：LOD，HRP，ABTS，缓冲液；乳酸检测反应体系配置范围为：ABTS溶液：LOD溶液:HRP溶液＝2.5‑5：1.4‑2.6：2‑5；检测方法使用430nm光谱读取吸光度值，利用酶标仪读取吸光度值，再作出标准曲线，即可利用标曲算出样品中乳酸含量；本发明用少量样品即可快捷、准确、大量地完成乳酸含量检测，同时实现降低单位样品检测的成本。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	杭州皓阳生物技术有限公司
发明人：	罗立彦;唐慧娴;李浩强;林帅
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-07T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-08T00:00:00+0800
申请号：	CN201910725221.8
公开号：	CN110426357A
代理机构：	杭州裕阳联合专利代理有限公司
代理人：	金方玮
分类号：	G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	311100 浙江省杭州市余杭区东湖街道新颜路22号
主权项：	1.一种乳酸检测试剂，其特征在于，包括：乳酸氧化酶，辣根过氧化物酶，2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸，缓冲液；乳酸检测反应体系配置范围为：2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶液：乳酸氧化酶溶液:辣根过氧化物酶溶液＝2.5-5：1.4-2.6：2-5；所述2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶液由2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸用缓冲液稀释得到；所述乳酸氧化酶溶液由乳酸氧化酶溶解于缓冲液中得到；所述辣根过氧化物酶溶液由辣根过氧化物酶溶解于缓冲液中得到。 2.根据权利要求1所述的一种乳酸检测试剂，其特征在于，所述乳酸检测反应体系配置为：2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶液：乳酸氧化酶溶液：辣根过氧化物酶溶液＝5：2：2。 3.根据权利要求1所述的一种乳酸检测试剂，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液；乳酸氧化酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度包括：10mg/L、25mg/L、50mg/L；辣根过氧化物酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度包括：5mg/L、7mg/L、9mg/L； 2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度包括：0.5mg/ml、1mg/ml、1.5mg/ml。 4.根据权利要求3所述的一种乳酸检测试剂，其特征在于，所述乳酸氧化酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为10mg/L；辣根过氧化物酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为7mg/L； 2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为1mg/ml。 5.根据权利要求3所述的一种乳酸检测试剂，其特征在于，所述乳酸氧化酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为10mg/L；辣根过氧化物酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为7mg/L； 2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为0.5mg/ml。 6.根据权利要求3所述的一种乳酸检测试剂，其特征在于，所述乳酸氧化酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为50mg/L；辣根过氧化物酶溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为5mg/L； 2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶解于磷酸盐缓冲液中的终浓度为0.5mg/ml。 7.一种乳酸检测方法，其特征在于，包括如下内容：在稀释板中加缓冲液，和样品或标准品，将样品或标准品稀释一百倍；根据需要检测样品的个数，配制适量体积的乳酸检测反应液；所述乳酸反应液包括：乳酸氧化酶，辣根过氧化物酶，2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸，缓冲液；乳酸检测反应体系配置范围为：2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶液：乳酸氧化酶溶液:辣根过氧化物酶溶液＝2.5-5：1.4-2.6：2-5；在检测板中加反应液，再在含有反应液的孔中加入被稀释后的样品及标准品，再稀释10倍；将含有样品或标准品的反应液避光放置15-20分钟，在酶标仪上用吸光波长为430nm检测样品乳酸浓度，作出标准曲线，计算样品乳酸含量。 8.根据权利要求7所述的一种乳酸检测方法，其特征在于，包括如下内容：在稀释板中加90ul缓冲液，加入10ul样品或标准品，混匀，稀释10倍；在稀释板中加90ul缓冲液，加入10ul稀释10倍后的样品或标准品，混匀，稀释100倍；根据需要检测样品的个数，配制适量体积的乳酸检测反应液；所述乳酸反应液包括：乳酸氧化酶，辣根过氧化物酶，2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸，缓冲液；乳酸检测反应体系配置范围为：2'-联氨-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸溶液：乳酸氧化酶溶液:辣根过氧化物酶溶液＝2.5-5：1.4-2.6：2-5；在检测板中加90ul反应液，再在含有反应液的孔中加入10ul被稀释后的样品及标准品，再稀释10倍；将含有样品或标准品的反应液避光放置15-20分钟，在酶标仪上用吸光波长为430nm检测样品乳酸浓度，作出标准曲线，计算样品乳酸含量。 9.根据权利要求7或8所述的一种乳酸检测方法，其特征在于，所述稀释板为96孔稀释板，检测板为96孔检测板。 10.根据权利要求7或8所述的一种乳酸检测方法，其特征在于，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。
所属类别：	发明专利