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原文传递一种基于共轭聚合物纳米粒子和金纳米棒的荧光探针及其应用

专利名称：	一种基于共轭聚合物纳米粒子和金纳米棒的荧光探针及其应用
摘要：	本发明提供一种基于共轭聚合物纳米粒子（PBOC）和金纳米棒的荧光探针和HA作为猝灭剂连接两者的检测HAase的新型荧光方法。通过将课题组设计的一种共轭聚合物PBOC与聚乙烯亚胺（PEI）进行纳米共沉淀，得到一种表面富含氨基基团（带正电）的新型共轭聚合物纳米粒子（CPNs‑PBOC‑NH2）。并利用氯金酸和抗坏血酸等通过晶种生长法制备出一种金纳米棒（Au NPs）。因为静电吸附作用，CPNs‑PBOC‑NH2、HA和金纳米棒先后自组装成纳米探针（CPNs‑PBOC‑NH2‑HA‑Au），通过FRET作用，使得CPNs‑PBOC‑NH2的荧光猝灭。随着HAase的引入，HA被降解成小片段，导致CPNs‑PBOC‑NH2的释放即荧光恢复。经过实验证明，这种基于共轭聚合物纳米粒子和金纳米棒的荧光探针对HAase具有很高的选择性和敏感性，具有良好的实际应用之价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	齐鲁工业大学
发明人：	张献;王秋波;徐超;张翠娇;刘钦泽;姚金水
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910763845.9
公开号：	CN110455761A
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	250353山东省济南市西部新城大学科技园
主权项：	1.一种共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针包括羧基化的共轭聚合物纳米粒子(CPNs-PBOC-NH2)和金纳米棒；其中，所述羧基化的共轭聚合物纳米粒子CPNs-PBOC-NH2，其制备方法如下： PBOC和功能聚合物PEI溶于四氢呋喃；经过超声，形成均匀溶液，然后，在超声的条件下快速倒入超纯水超声，旋蒸除去四氢呋喃，过滤即得；所述PBOC结构式如下：所述PEI结构式如下： 2.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述PBOC的n为大于0的自然数，优选为大于45的自然数，进一步优选为50，所述PBOC结构单元分子量为689。 3.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述PBOC的制备方法，包括：将四乙基(2,5’-二(乙基己基)-1,4’-亚苯基)二(亚甲基)二磷酸酯加入到除水的四氢呋喃中，并氮气保护，反应混合物保持在冷浴下，然后将叔丁醇钾加入到混合物中，并持续氮气保护，继续搅拌后移至油浴，加入N-正辛基-3,6’-二甲酰基-咔唑，继续氮气保护反应，反应完成后倒入水中，并用二氯甲烷萃取，减压蒸馏除去二氯甲烷，残渣用四氢呋喃和正己烷分级沉淀法提纯，得橘黄色固体即PBOC。 4.如权利要求3所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述四乙基(2,5’-二(乙基己基)-1,4’-亚苯基)二(亚甲基)二磷酸酯、叔丁醇钾与N-正辛基-3,6’-二甲酰基-咔唑的质量比为0.4～1：0.1～0.4：0.1～0.5(优选为0.6：0.25：0.35)。 5.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述PEI的n为大于0的自然数，优选为大于800的自然数，进一步优选为864，所述PEI的结构单元分子量为202。 6.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针包括羧基化的共轭聚合物纳米粒子(CPNs-PBOC-NH2)和金纳米棒；其中，所述金纳米棒，其制备方法如下：首先，利用CTAB、HAuCl4·4H2O和强还原剂NaBH4制备金种溶液老化2～3h；然后利用CTAB、HAuCl4·4H2O和AgNO3配置生长溶液；最后利用弱还原剂抗坏血酸得到金纳米棒。 7.权利要求1-6任一项所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针在检测透明质酸酶中的应用。 8.一种透明质酸酶的检测方法，其特征在于，所述方法包括：将CPNs-PBOC-NH2溶液和透明质酸钠溶液在室温下孵育处理；然后将金纳米棒加入到孵育中的溶液继续孵育；向孵育完成后的溶液中加入待测样品进行荧光定量检测。 9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述CPNs-PBOC-NH2与金纳米棒的质量摩尔比为1μg：1.86～14.88μmol(优选为1μg：7.44μmol)。
所属类别：	发明专利