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原文传递瓜氨酸肽及其应用、类风湿关节炎的检测试剂与试剂盒

专利名称：	瓜氨酸肽及其应用、类风湿关节炎的检测试剂与试剂盒
摘要：	本发明公开了一种瓜氨酸肽及其应用、类风湿关节炎的检测试剂与试剂盒，涉及类风湿关节炎检测技术领域。本发明公开的瓜氨酸肽氨基酸序列如SEQ ID NO.1‑9中的任意一种所示。本发明提供的瓜氨酸肽，其可以作为抗CCP抗体的抗原，检测类风湿关节炎患者的抗CCP抗体，具有敏感性高和特异性强的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东菲鹏生物有限公司
发明人：	代双;夏良雨;吕伟华;柯拓
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910797569.8
公开号：	CN110456074A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	周文波
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	523000广东省东莞市松山湖高新技术产业开发区花莲路5号1号厂房7楼
主权项：	1.一种瓜氨酸肽，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1-9中的任意一种所示。 2.根据权利要求1所述的瓜氨酸肽，其特征在于，所述瓜氨酸肽第4位半胱氨酸残基与第17位的半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。 3.瓜氨酸肽作为类风湿关节炎的抗原在制备类风湿关节炎检测试剂中的应用，其特征在于，所述瓜氨酸肽选自氨基酸序列如SEQ ID NO.1-9中的至少一种。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述瓜氨酸肽选自如下组合中的任意一种组合：SEQ ID NO.1和8的组合、SEQ ID NO.2和8的组合、SEQ ID NO.1、2和8的组合以及SEQID NO.1、2、4和8的组合；优选地，SEQ ID NO.1-9中任意一者所示的瓜氨酸肽的第4位半胱氨酸残基与第17位的半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。 5.一种用于检测类风湿关节炎的抗原，其特征在于，其包括如SEQ ID NO.1-9中的任意一种或几种所示的瓜氨酸肽；优选地，所述抗原选自如下组合中的任意一种组合：SEQ ID NO.1和8的组合、SEQ IDNO.2和8的组合、SEQ ID NO.1、2和8的组合以及SEQ ID NO.1、2、4和8的组合；优选地，SEQ ID NO.1-9中任意一者所示的瓜氨酸肽的第4位半胱氨酸残基与第17位的半胱氨酸残基通过二硫键形成环状结构。 6.一种类风湿关节炎的检测试剂，其特征在于，其包括氨基酸序列如SEQ ID NO.1-9中的任意一种或几种所示的瓜氨酸肽。 7.根据权利要求6所述的检测试剂，其特征在于，所述瓜氨酸肽以偶联于固相颗粒上的形式存在；优选地，所述固相颗粒为磁珠或乳胶微粒；优选地，所述固相颗粒表面带有修饰基团，所述修饰基团选自如下基团中的至少一种：氨基、羧基、甲苯磺酰基和环氧基；优选地，所述磁珠表面修饰有氨基或羧基，所述瓜氨酸肽通过偶联剂偶联于所述磁珠表面；优选地，当所述磁珠表面修饰有羧基时，所述偶联剂选自EDC和NHS中的至少一种；当所述磁珠表面修饰有氨基时，所述偶联剂选自SMCC、Sulfo-SMCC、SMPEG2、SMPEG4、SMPEG 6、SMPEG8、SMPEG12、SMPEG24、LC-SMCC、2-IT、STAT和STAP中的至少一种。 8.如权利要求6或7所述的检测试剂的制备方法，其特征在于，其包括：获得SEQ IDNO.1-9中的任意一种或几种所示的瓜氨酸肽；优选地，所述制备方法包括：将获得的所述瓜氨酸肽与固相颗粒混合以使所述瓜氨酸肽偶联至所述固相颗粒上；优选地，所述固相颗粒为磁珠或乳胶微粒；优选地，所述固相颗粒表面带有修饰基团，所述修饰基团选自如下至少一种：氨基、羧基、甲苯磺酰基和环氧基；优选地，所述固相颗粒为磁珠，所述磁珠修饰有羧基或氨基；优选地，每mg所述磁珠对应加入5-100μg所述瓜氨酸肽进行混合，更优选为加入10-50μg瓜氨酸肽进行混合；优选地，加入所述瓜氨酸肽后，将得到的混合体系置于15-45℃条件下反应15-300min，更优选为反应30-120min。 9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，在将所述瓜氨酸肽与所述磁珠混合之前，所述制备方法还包括：活化步骤；所述活化步骤包括：用缓冲液重悬所述磁珠，往重悬液中加入偶联剂进行活化；优选地，当所述磁珠表面修饰有羧基时，所述偶联剂选自EDC和NHS中的至少一种；当所述磁珠表面修饰有氨基时，所述偶联剂选自SMCC、Sulfo-SMCC、SMPEG2、SMPEG4、SMPEG 6、SMPEG8、SMPEG12、SMPEG24、LC-SMCC、2-IT、STAT和STAP中的至少一种；优选地，所述缓冲液为Mes或PBS。 10.一种类风湿关节炎的检测试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1所述的瓜氨酸肽、权利要求5所述的抗原或者权利要求6或7所述的检测试剂。
所属类别：	发明专利