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原文传递用于测定活体样品中的测定对象物质的试剂盒及方法

专利名称：	用于测定活体样品中的测定对象物质的试剂盒及方法
摘要：	本发明的课题在于提供一种能够在从低浓度至高浓度的广泛范围的浓度区域中实现活体样品中的测定对象物质的高精确度的测定的试剂盒及方法。根据本发明，提供一种用于测定活体样品中的测定对象物质的试剂盒，其包括：标记粒子，包含与活体样品中的测定对象物质具有结合性的第一结合物质及第一封闭剂；及基板，包含与上述测定对象物质或上述第一结合物质中的任一个具有结合性的第二结合物质及第二封闭剂，上述标记粒子为含有由下述式(1)表示的至少一种化合物和粒子的发光性标记粒子，上述第一封闭剂与上述第二封闭剂各自互不相同。式(1)中的各记号表示在本说明书记载的含义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	日本;JP
申请人：	富士胶片株式会社
发明人：	知久浩之;渡边康介;金子和平;滨田和博;佐佐木晃逸;吉冈知昭;花木直幸
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201880022543.X
公开号：	CN110476062A
代理机构：	中科专利商标代理有限责任公司
代理人：	张国梁;张莹
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	日本国东京都
主权项：	1.一种用于测定活体样品中的测定对象物质的试剂盒，其包括：标记粒子，包含与活体样品中的测定对象物质具有结合性的第一结合物质及第一封闭剂；以及基板，包含与所述测定对象物质或所述第一结合物质中的任一个具有结合性的第二结合物质及第二封闭剂，在所述试剂盒中，所述标记粒子为含有由下述式(1)表示的至少一种化合物和粒子的发光性标记粒子，所述第一封闭剂与所述第二封闭剂各自互不相同， [化学式1] 式中，R11～R15分别独立地表示氢原子、卤原子、烷基、芳基、杂环基、乙烯基、乙炔基、氨基、酰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基，R11～R15中的至少3个表示除氢原子以外的原子或基团；X1及X2分别独立地表示卤原子、烷基、芳基、杂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、乙烯基或乙炔基，它们也可以具有取代基，X1及X2可以相互连结而形成环；Ar1及Ar2分别独立地表示芳基或杂环基，它们也可以具有取代基；L1及L2分别独立地表示式(L-1)～式(L-4)中的任一个； [化学式2] 式中，R111～R116分别独立地表示氢原子、卤原子、烷基、芳基、杂环基、乙烯基、乙炔基、氨基、酰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基；A表示-O-、-S-或-NH-。 2.根据权利要求1所述的试剂盒，其中，所述标记粒子为标记胶乳粒子。 3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其中，所述标记粒子具有羧基。 4.根据权利要求1至3中任一项所述的试剂盒，其中，所述标记粒子的平均粒径为70～500nm。 5.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒，其中，由所述式(1)表示的化合物为由下述式(3)表示的化合物， [化学式3] 式中，R11、R12、R14、R15、X1、X2、Ar1、Ar2、L1及L2与式(1)中的定义含义相同，其中，R11、R12、R14及R15中的至少2个为除氢原子以外的原子或基团；R31～R35分别独立地表示氢原子、卤原子、烷基、芳基、杂环基、乙烯基、乙炔基、氨基、酰基、氰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基，R31、R32、R34及R35中的任1个为由2个原子以上构成的基团。 6.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒，其中，由所述式(1)表示的化合物为由下述式(4)表示的化合物， [化学式4] 式中，R12、R13、R14、X1、X2、Ar1、Ar2、L1及L2与式(1)中的定义含义相同，其中，R12、R13及R14中的至少1个为除氢原子以外的原子或基团；R41及R42分别独立地表示芳基、杂环基、乙烯基或乙炔基，它们也可以具有取代基。 7.根据权利要求1至4中任一项所述的试剂盒，其中，由所述式(1)表示的化合物为由下述式(5)表示的化合物， [化学式5] 式中，R11～R15、X1、X2、L1及L2与式(1)中的定义含义相同；R51及R52分别独立地表示烷基、芳基、杂芳基、氨基、酰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基；Q1及Q2分别独立地表示芳香族烃环或芳香族杂环，它们也可以具有取代基。 8.根据权利要求1至7中任一项所述的试剂盒，其中，所述标记粒子为含有至少一种能量供体化合物、至少一种能量受体化合物及粒子的发光性粒子，所述能量供体化合物及所述能量受体化合物中的至少一种为由下述式(1)表示的化合物。 9.根据权利要求8所述的试剂盒，其中，作为所述能量供体化合物，含有至少一种由所述式(1)表示的化合物，作为所述能量受体化合物，含有至少一种由所述式(1)表示的化合物。 10.根据权利要求8或9所述的试剂盒，其中，能量供体化合物与能量受体化合物的摩尔比为1∶10～10∶1。 11.根据权利要求8至10中任一项所述的试剂盒，其中，能量供体化合物与能量受体化合物的斯托克斯位移为40nm以上。 12.根据权利要求1至11中任一项所述的试剂盒，其中，所述基板具有包含所述第二结合物质和第二封闭剂的检测区域。 13.根据权利要求12所述的试剂盒，其中，所述检测区域为包含金的金属膜。 14.根据权利要求1至13中任一项所述的试剂盒，其中，所述第一封闭剂与所述第二封闭剂为各自互不相同的蛋白质。 15.根据权利要求14所述的试剂盒，其中，所述第一封闭剂为白蛋白及球蛋白中的其中一个，所述第二封闭剂为白蛋白及球蛋白中的另一个。 16.根据权利要求14或15所述的试剂盒，其中，所述第一封闭剂为球蛋白，所述第二封闭剂为白蛋白。 17.根据权利要求15或16所述的试剂盒，其中，所述白蛋白为牛血清白蛋白。 18.根据权利要求15至17中任一项所述的试剂盒，其中，所述球蛋白为除与所述测定对象物质具有结合性的免疫球蛋白以外的免疫球蛋白。 19.一种测定活体样品中的测定对象物质的方法，包含以下工序：反应工序，使活体样品与包含与测定对象物质具有结合性的第一结合物质和第一封闭剂的标记粒子进行反应；捕捉工序，使在所述反应工序中获得的反应产物和包含与所述测定对象物质或所述第一结合物质中的任一个具有结合性的第二结合物质和第二封闭剂的基板接触，从而在基板上捕捉标记粒子；以及标记信息获取工序，获取与所述测定对象物质相关的标记信息，所述标记粒子为含有由下述式(1)表示的至少一种化合物和粒子的发光性的标记粒子，所述第一封闭剂与所述第二封闭剂各自互不相同， [化学式6] 式中，R11～R15分别独立地表示氢原子、卤原子、烷基、芳基、杂环基、乙烯基、乙炔基、氨基、酰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基，R11～R15中的至少3个表示除氢原子以外的原子或基团；X1及X2分别独立地表示卤原子、烷基、芳基、杂环基、羟基、烷氧基、芳氧基、烷硫基、芳硫基、乙烯基或乙炔基，它们也可以具有取代基，X1及X2可以相互连结而形成环；Ar1及Ar2分别独立地表示芳基或杂环基，它们也可以具有取代基；L1及L2分别独立地表示式(L-1)～式(L-4)中的任一个； [化学式7] 式中，R111～R116分别独立地表示氢原子、卤原子、烷基、芳基、杂环基、乙烯基、乙炔基、氨基、酰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基；A表示-O-、-S-或-NH-。 20.根据权利要求19所述的方法，其中，所述标记粒子为标记胶乳粒子。 21.根据权利要求19或20所述的方法，其中，所述标记粒子具有羧基。 22.根据权利要求19至21中任一项所述的方法，其中，所述标记粒子的平均粒径为70～500nm。 23.根据权利要求19至22中任一项所述的方法，其中，由所述式(1)表示的化合物是由下述式(3)表示的化合物， [化学式8] 式中，R11、R12、R14、R15、X1、X2、Ar1、Ar2、L1及L2与式(1)中的定义含义相同，其中，R11、R12、R14及R15中的至少2个是除氢原子以外的原子或基团；R31～R35分别独立地表示氢原子、卤原子、烷基、芳基、杂环基、乙烯基、乙炔基、氨基、酰基、氰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基，R31、R32、R34及R35中的任一个是由2个原子以上构成的基团。 24.根据权利要求19至22中任一项所述的方法，其中，由所述式(1)表示的化合物是由下述式(4)表示的化合物， [化学式9] 式中，R12、R13、R14、X1、X2、Ar1、Ar2、L1及L2与式(1)中的定义含义相同，其中，R12、R13及R14中的至少1个是除氢原子以外的原子或基团；R41及R42分别独立地表示芳基、杂环基、乙烯基或乙炔基，它们也可以具有取代基。 25.根据权利要求19至22中任一项所述的方法，其中，由所述式(1)表示的化合物是由下述式(5)表示的化合物， [化学式10] 式中，R11～R15、X1、X2、L1及L2与式(1)中的定义含义相同；R51及R52分别独立地表示烷基、芳基、杂芳基、氨基、酰基、烷氧基、芳氧基、烷硫基或芳硫基，它们也可以具有取代基；Q1及Q2分别独立地表示芳香族烃环或芳香族杂环，它们也可以具有取代基。 26.根据权利要求19至25中任一项所述的方法，其中，所述标记粒子为含有至少一种能量供体化合物、至少一种能量受体化合物及粒子的发光性粒子，所述能量供体化合物及所述能量受体化合物中的至少一种为由所述式(1)表示的化合物。 27.根据权利要求26所述的方法，其中，作为所述能量供体化合物，含有至少一种由所述式(1)表示的化合物，作为所述能量受体化合物，含有至少一种由所述式(1)表示的化合物。 28.根据权利要求26或27所述的方法，其中，能量供体化合物与能量受体化合物的摩尔比为1∶10～10∶1。 29.根据权利要求26至28中任一项所述的方法，其中，能量供体化合物与能量受体化合物的斯托克斯位移为40nm以上。 30.根据权利要求19至26中任一项所述的方法，其中，所述基板具有包含所述第二结合物质和第二封闭剂的检测区域。 31.根据权利要求19至30中任一项所述的方法，其中，所述第一封闭剂与所述第二封闭剂为各自互不相同的蛋白质。 32.根据权利要求19至31中任一项所述的方法，其中，所述第一封闭剂为白蛋白及球蛋白中的其中一个，所述第二封闭剂为白蛋白及球蛋白中的另一个。 33.根据权利要求32所述的方法，其中，所述第一封闭剂为球蛋白，所述第二封闭剂为白蛋白。 34.根据权利要求32或33所述的方法，其中，所述白蛋白为牛血清白蛋白。 35.根据权利要求32至34中任一项所述的方法，其中，所述球蛋白为除与所述测定对象物质具有结合性的免疫球蛋白以外的免疫球蛋白。 36.根据权利要求30至35中任一项所述的方法，其中，所述检测区域在包含金的金属膜上。 37.根据权利要求36所述的方法，其中，通过基于表面等离子体激元激发的荧光检测，获取与测定对象物质的量相关的标记信息。
所属类别：	发明专利