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原文传递一种高灵敏的吲哚电化学检测方法

专利名称：	一种高灵敏的吲哚电化学检测方法
摘要：	本发明公开了一种高灵敏的吲哚电化学检测方法。本发明采用金磁纳米粒子(GMPs)复合材料，通过Au‑S键将4‑氨基苯硫酚(4‑ATP)固定于AuNPs上，将吲哚与重氮化反应后的ATP@GMPs发生偶合反应，形成Indole‑diazo‑ATP@GMPs复合物，利用外加磁场将该复合物富集于丝网印刷碳电极工作电极表面。采用示差脉冲伏安法进行电化学检测，根据电化学响应信号与待测物浓度之间的线性关系，实现对吲哚的灵敏、高效、准确的定量检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	重庆医科大学
发明人：	张晓清;陈红;丁敏;罗娟;周莹;王浩然
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910776063.9
公开号：	CN110441371A
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	400016重庆市渝中区医学院路1号
主权项：	1.一种高灵敏的吲哚电化学检测方法，其特征在于，包括如下具体步骤： (1)金磁纳米粒子(Gold magnetic particles,GMPs)复合材料的合成：将5.0mg/mL磁性Fe3O4纳米粒子分散于含0.05mmol/L HAuCl4、125.0mmol/L异丙醇和10.0mg/mL聚乙烯醇水溶液中，形成含0.1mg/mL Fe3O4纳米粒子的混合溶液；将混合溶液超声15min，超声功率为120W，分散均匀后，置于玻璃试剂瓶中，采用6.0MeV的高能电子束进行辐照，辐照剂量为6kGy，得到分散均匀的GMPs复合材料，再置于4℃冰箱避光保存。 (2)Indole-diazo-ATP@GMPs复合物的制备： a.将上述步骤(1)中制备的所述GMPs复合材料与等体积的1.0mmol/L 4-氨基苯硫酚(4-ATP)甲醇/水(1/49，v/v)溶液(由1mL 50.0mmol/L的4-ATP甲醇溶液加49mL水稀释而成)混合均匀，孵育12h；将混合溶液置于磁性分离器上，用超纯水洗涤后，再用1mL盐酸(pH3.0)重新分散，得到ATP@GMPs复合物水溶液，置于4℃冰箱避光保存； b.取1mL步骤a中得到的所述ATP@GMPs复合物，加入100μL 10.0mmol/L NaNO2水溶液得到混合溶液，在冰水浴条件下置于快速振荡器中的微孔板上进行重氮化反应，反应时间30min，得到diazo-ATP@GMPs复合物溶液； c.吲哚标准溶液准备：将1.0mg吲哚标准品溶于1mL水中配置成1.00g/L吲哚标准储存液，用0.1mol/L PBS(pH 5.0)稀释1.00g/L吲哚标准储备液得到系列浓度的吲哚标准溶液； d.取70μL步骤b中得到的所述diazo-ATP@GMPs复合物溶液，加入100μL步骤c中得到的吲哚标准液，用NaOH溶液调节混合溶液的pH值至5.0，在冰水浴条件下置于快速振荡器中的微孔板上进行偶合反应，反应时间35min，制得Indole-diazo-ATP@GMPs复合物。 (3)电化学检测将步骤(2)中得到的所述Indole-diazo-ATP@GMPs复合物置于磁性分离器上，用0.1mol/L PBS(pH 5.0)洗涤3次，然后滴涂于丝网印刷碳电极(Screen printed carbonelectrode,SPCE)工作电极表面，自然晾干；将SPCE与电化学工作站连接，并在SPCE下面放置磁铁，滴加50μL pH值为7.0的支持电解质溶液于所述电极表面，采用示差脉冲伏安法，进行吲哚的检测。 2.根据权利要求1所述的电化学检测方法，其特征在于，所述SPCE包括一印制电极的聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)基片、PET基片上印制的外部绝缘层和基片上一端的导线接口，其特征在于所述的基片上还印制有三个电极，分别为碳工作电极、Ag/AgCl参比电极和Ag/AgCl对电极，三个电极形成一圆形工作区域，各电极通过绝缘膜下印制的导线与接口相连。 3.根据权利要求1-3所述的电化学检测方法，其特征在于，所述的pH值为7.0的支持电解质溶液由含0.10mol/L K2SO4的0.10mol/L NaH2PO4-Na2HPO4缓冲溶液组成。 4.根据权利要求1-3所述的电化学检测方法，其特征在于，所述电化学工作站的参数设置为：低电位0.2V，高电位1.0V，振幅100mV，脉冲宽度0.05s，脉冲周期0.2s。
所属类别：	发明专利