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组合型基质DHB/DHBH在MALDI质谱中对还原糖检测中的应用
| 专利名称： | 组合型基质DHB/DHBH在MALDI质谱中对还原糖检测中的应用 |
| 摘要： | 本发明公开了DHBH(2,5‑二羟基苯甲酰肼)作为新型反应型基质与DHB(2,5‑二羟基苯甲酸)进行组合(DHB/DHBH)对还原糖进行高通量定性定量检测中的应用。在MALDI质谱中，基于DHB/DHBH的靶板衍生化策略可实现对还原糖高通量定性定量分析。DHBH具有酰肼基活性基团，作为反应型基质容易与还原糖半缩醛反应，可显著提高电离化效率；同时，DHBH作为基质可辅助糖类离子化，因此过量的DHBH无需分离。DHB为有机酸，可极大地催化成腙反应的进行；同时DHB作为糖类最常用的基质可辅助其离子化。DHB/DHBH作为基质对酸性糖和中性糖的检测均适用。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江大学 |
| 发明人： | 潘远江;赵晓勇;黄丽丽 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-05-15T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-11-22T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910406100.7 |
| 公开号： | CN110487888A |
| 代理机构： | 杭州求是专利事务所有限公司 |
| 代理人： | 陈升华 |
| 分类号： | G01N27/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N27 |
| 申请人地址： | 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘路866号 |
| 主权项： | 1.2,5-二羟基苯甲酰肼和2,5-二羟基苯甲酸的组合型基质在MALDI质谱中对还原糖检测中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的2,5-二羟基苯甲酰肼如式(1)所示： 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的对还原糖检测为对还原糖进行高通量定性定量检测，所述的应用具体包括如下步骤： 1、试剂配制 配制DHB甲醇溶液，DHB为2,5-二羟基苯甲酸；以DHBH为溶质，DHBH为2,5-二羟基苯甲酰肼，DHB甲醇溶液为溶剂，配制DHB/DHBH混合基质甲醇溶液；配制待测还原糖的水溶液； 2、点样 分别取等体积的待测还原糖的水溶液和DHB/DHBH混合基质甲醇溶液，依次点在抛光靶板的同一个点样孔，在抛光靶板上直接进行混匀，得到点样后的靶板。 3、靶板衍生化反应 点样后的靶板在66666℃下放置26646min，混合样品点完全干燥，进行MALDI质谱分析。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤1中，所述的DHB/DHBH混合基质甲醇溶液中DHBH的浓度为6.6566.15mol/L。 5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤1中，所述的DHB/DHBH混合基质甲醇溶液中DHB和DHBH的摩尔浓度比为1:164:1。 6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2中，待测还原糖水溶液的点样体积为6.561.6μL。 7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2中，DHB/DHBH混合基质溶液的点样体积为6.561.6μL。 8.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤2中，待测还原糖的水溶液和DHB/DHBH混合基质溶液的混匀使用移液枪在抛光靶板进行重复吸打16626次。 9.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤3中，点样后的靶板在65℃下放置36min。 10.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，步骤3中，所述的MALDI质谱分析采用的检测模式为正离子模式或负离子模式或反射模式或线性模式。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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