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原文传递一种脂类的半定量分析方法

专利名称：	一种脂类的半定量分析方法
摘要：	本发明技术方案公开了一种脂类的半定量分析方法，将待测样本、内标试剂、提取试剂和分离试剂混合均匀后，使其分层形成上层待测样本和下层待测样本，通过高效液相色谱‑串联质谱系统检测下层待测样本和定标试剂，从而获得定标试剂和待测样本的质谱检测结果，参照内标得到待测样本中脂类的半定量结果。本发明技术方案的分析方法采用少量的血清即可有效地对脂类进行半定量分析。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天津云检医学检验所有限公司
发明人：	凌雪峰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910786425.2
公开号：	CN110470764A
代理机构：	北京卫智畅科专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	陈佳
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	300450 天津市滨海新区天津市滨海高新区滨海科技产业园高新六路39号9-3-401
主权项：	1.一种脂类的半定量分析方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)收集待测样本； (2)分别配制内标试剂、提取试剂及分离试剂； (3)按一定比例将所述待测样本、所述内标试剂、所述提取试剂和所述分离试剂混合均匀后，使其分层形成上层待测样本和下层待测样本； (4)抽取部分所述下层待测样本，并将抽取的下层待测样本进行高效液相色谱-串联质谱系统检测； (5)获得内标试剂和待测样本的质谱图，参照内标得到待测样本中脂类的半定量结果。 2.如权利要求1所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述待测样本为待测血清。 3.如权利要求1所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述内标试剂包括d14:1磷脂胆碱、d18:1-12:0鞘磷脂、D7-d15:0胆固醇酯、d15:0磷脂乙醇胺、d15:0磷脂甘油、d18:1-17:0神经酰胺、d18:1-12:0半乳糖苷神经酰胺、d17:0磷脂酸、D7-胆固醇、d18:1-24:0神经酰胺磷酸酯和D5-17:0-17:1-17:0甘油三酯中的至少一种。 4.如权利要求1所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述提取试剂包括氯仿和/或甲醇；优选地，所述分离试剂包括氯化锂和/或水。 5.如权利要求1所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述将抽取的下层待测样本进行高效液相色谱-串联质谱系统检测，包括如下步骤：采用流动相试剂平衡高效液相色谱系统；移除高效液相色谱系统中的所有色谱柱；将抽取的下层待测样本以流动注射进样的方式注入高效液相色谱-串联质谱系统中进行检测分析。 6.如权利要求5所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述流动相试剂包括第一流动相试剂、第二流动相试剂和第三流动相试剂；所述第一流动相试剂为氢氧化锂的甲醇溶液，用于磷脂胆碱、鞘磷脂和半乳糖苷神经酰胺的定量分析；所述第二流动相试剂为碳酸氢铵的甲醇溶液，用于神经酰胺、神经酰胺磷酸酯、磷脂肌醇、磷脂酸、磷脂甘油和磷脂乙醇胺的定量分析；所述第三流动相试剂为甲酸铵和甲酸的甲醇溶液，用于胆固醇酯、甘油二酯和甘油三酯的定量分析。 7.如权利要求6所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，在高效液相色谱系统中，分别使用第一流动相试剂、第二流动相试剂和第三流动相试剂以任意的串行顺序对脂类进行分离，每次分离所得的待测样本作为一个批次加入串联质谱系统。 8.如权利要求1所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述参照内标得到待测样本中脂类的半定量结果，包括：根据内标试剂和待测样本的质谱图，获得内标试剂和待测样本的相对峰质谱图；在内标试剂和待测样本的相对峰质谱图中，获得内标试剂和待测样本中相应脂类的峰值之比，根据相应脂类的峰值之比等于相应脂类的数量之比，计算出相应脂类的数量。 9.如权利要求1所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，所述串联质谱系统使用电喷雾离子源和/或常压化学电离离子源。 10.如权利要求9所述的脂类的半定量分析方法，其特征在于，用于磷脂胆碱、鞘磷脂、半乳糖苷神经酰胺、神经酰胺、神经酰胺磷酸酯、磷脂肌醇、磷脂酸、磷脂甘油和磷脂乙醇胺的定量分析时，使用电喷雾离子源；用于胆固醇酯、甘油二酯和甘油三酯的定量分析时，使用常压化学电离离子源。
所属类别：	发明专利