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原文传递样品中细胞的分类和计数方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板

专利名称：	样品中细胞的分类和计数方法、生物测定试剂盒和微孔阵列板
摘要：	提供了一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法。该方法包括将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入多个微孔中相应的一个微孔中；向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在多个微孔中分别施加有第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于该第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	京东方科技集团股份有限公司
发明人：	崔皓辰;张湛;李婧
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201980000588.1
公开号：	CN110476058A
代理机构：	北京天昊联合知识产权代理有限公司
代理人：	柴亮;张天舒
分类号：	G01N27/04(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	100015 北京市朝阳区酒仙桥路10号
主权项：	1.一种对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法，包括: 将多个细胞分别引入多个微孔中，其中，在至少80％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入所述多个微孔中相应的一个微孔中；向分别位于所述多个微孔中的多个细胞单独施加第一电流；检测在所述多个微孔中分别施加有所述第一电流的多个细胞的第一阻抗值；基于所述第一阻抗值的第一分布将多个细胞的第一组分类为第一类型；以及计数多个细胞的第一组的总数。 2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述第一电流是直流电或频率不超过100kHz的低频交流电。 3.根据权利要求1所述的方法，还包括：向分别位于所述多个微孔中的多个细胞单独施加第二电流，所述第二电流为高频交流电；检测在所述多个微孔中分别施加有所述第二电流的多个细胞的第二阻抗值；基于所述第二阻抗值的第二分布将所述多个细胞的第二组分类为第二类型；以及计数所述多个细胞的第二组的总数。 4.根据权利要求3所述的方法，其中，所述第二阻抗值的第二分布识别多个细胞的第二组和多个细胞的第三组；所述方法还包括基于该第二阻抗值的第二分布将多个细胞的第三组分类为第三类型；以及计数多个细胞的第三组的总数。 5.据权利要求3所述的方法，其中，所述高频交流电的频率大于1兆赫。 6.根据权利要求1至5任意一项所述的方法，其中，所述多个微孔中的每一个的直径在15μm至40μm的范围内，深度在25μm至40μm的范围内；以及所述多个微孔中的两个相邻微孔之间的距离在25μm至40μm的范围内。 7.根据权利要求1至6任意一项所述的方法，其中，将所述多个细胞分别引入所述多个微孔中包括将包含悬浮在电解质中的细胞的样品引入包含多个微孔的微孔阵列板上；以及向样品施加电场以将多个细胞分别驱动到多个微孔中。 8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述电场通过第一导电层和第二导电层分别施加在所述微孔阵列板的相对两侧，所述多个微孔夹在第一导电层和第二导电层之间。 9.根据权利要求1至8任意一项所述的方法，其中，所述细胞包括白细胞，所述白细胞包括淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的一种或其组合。 10.根据权利要求1至9任意一项所述的方法，其中，在至少95％的所述多个微孔中，不超过一个细胞被引入所述多个微孔中相应的一个微孔中。 11.一种用于对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的生物测定试剂盒，包括：微孔阵列板；以及使用生物测定试剂盒对包含悬浮在电解质中的细胞的样品中的细胞进行分类和计数的方法的说明；其中，所述微孔阵列板包括：基底；在所述基底上限定多个微孔的微孔壁层；以及在所述基底上的包括多对电极的电极层；其中，所述多对电极中相应的一对位于多个微孔中相应的一个微孔中，并且包括第一电极和第二电极。 12.根据权利要求11所述的生物测定试剂盒，还包括一个或多个电源调节器，用于向分别位于多个微孔中的多个细胞单独施加电流；其中，一个或多个电源调节器能够产生至少两种具有不同频率的电流。 13.根据权利要求12所述的生物测定试剂盒，其中，至少两种具有不同频率的电流包括第一类型电流和第二类型电流；所述第一类电流是直流电或频率不超过100kHz的低频交流电；以及所述第二类型电流是频率大于1MHz的高频交流电。 14.根据权利要求11至13任意一项的生物测定试剂盒，其中，所述微孔阵列板还包括：基底上的第一导电层；在所述第一导电层的远离所述基底的一侧上的钝化层；在所述微孔壁层的远离所述第一导电层的一侧上的第二导电层；其中，所述多个微孔和所述微孔壁层夹在第一导电层和第二导电层之间。 15.根据权利要求12至14任意一项的生物测定试剂盒，还包括：数据分析器，该数据分析器被配置为基于分别从施加有至少两种具有不同频率的电流的多个微孔检测到的信号来计数不同类型的细胞。 16.根据权利要求11至15任意一项的生物测定试剂盒，其中，多个微孔中的每一个的直径在15μm至40μm范围内，深度在25μm至40μm范围内；以及所述多个微孔中的两个相邻微孔之间的距离在25μm至40μm的范围内。 17.根据权利要求11至16任意一项的生物测定试剂盒，其中，所述生物测定试剂盒是用于分类和计数样品中白细胞的试剂盒，所述白细胞包含淋巴细胞、中性粒细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞中的一种或其组合。 18.一种微孔阵列板，包括：基底；在所述基底上的限定了多个微孔的微孔壁层，以及在所述基底上的包括多对电极的电极层；其中，所述多对电极中相应的一对位于所述多个微孔中相应的一个微孔中，并且包括第一电极和第二电极；所述多个微孔中相应的一个的直径足以容纳样品中的单个细胞并且不足以容纳两个或多个细胞。 19.根据权利要求18所述的微孔阵列板，还包括：所述基底上的第一导电层；在所述第一导电层的远离所述基底的一侧上的钝化层；在微孔壁层的远离所述第一导电层的一侧上的第二导电层；其中，所述多个微孔和所述微孔壁层夹在所述第一导电层和所述第二导电层之间。 20.根据权利要求19所述的微孔阵列板，还包括在微孔壁层和第二导电层之间的间隔层。
所属类别：	发明专利