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原文传递肺炎链球菌的荚膜肿胀染色方法

专利名称：	肺炎链球菌的荚膜肿胀染色方法
摘要：	本发明提供了一种简单、有效的肺炎球菌荚膜染色方法。改进了现有荚膜染色的众多缺点。其特征是：改良后的染色方法具有操作简便、节省染料、易于观察等特点，可以取得比传统荚膜染色法更好的染色效果，提高了细菌染色的质量，简便的操作程序，不仅适用于微生物实验教学，也便于批量制作教学标本，值得在教学、科研、临床上的推广。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	北京智飞绿竹生物制药有限公司
发明人：	王瑞峰;胡国伟;朱卫华;杜琳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201910798783.5
公开号：	CN110501336A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为;孟旭
分类号：	G01N21/84(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	100176 北京市大兴区经济技术开发区同济北路22号
主权项：	1.一种肺炎链球菌的荚膜肿胀染色方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)取2片载玻片，分别滴加肺炎链球菌培养液； 2)分别滴加相应的肺炎链球菌特异性抗血清和氯化钠注射液与菌液混合，分别使用微量移液器枪头充分搅匀，并将液滴平铺，室温放置反应，自然晾干，经火焰固定； 3)染色，滴加草酸铵结晶紫染液或亚甲基蓝染液，水洗，吸水纸吸干水分； 4)负染，吸取一滴墨汁滴加到载玻片一侧，倾斜样品载玻片，用另一块载玻片接触墨汁并与样品载玻片成45度角，轻轻的向斜下方拉，使得墨汁覆盖染色面，最后室温自然干燥； 5)镜检，油镜观察。 2.根据权利要求1所述的染色方法，其特征在于，还包括进一步的判断过程：肺炎链球菌菌体染成紫红色或蓝色，菌体外有一无色透明荚膜区，背景为黑色，菌体、背景、荚膜对比非常明显，判为阳性；肺炎链球菌菌体染成紫红色或蓝色，菌体外无法看到透明的荚膜区，黑色背景与菌体相连，即为荚膜肿胀阴性对照。 3.根据权利要求1所述的染色方法，其特征在于，其中，氯化钠注射液的浓度为0.9％。 4.根据权利要求1所述的染色方法，其特征在于，其中，墨汁的浓度为10％。 5.根据权利要求1所述的染色方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)取2片载玻片，分别滴加肺炎链球菌培养液5μl； 2)分别滴加不同肺炎链球菌型别所对应的肺炎链球菌特异性抗血清5μl和氯化钠注射液5μl与菌液混合，分别使用微量移液器枪头充分搅匀，并将液滴平铺，室温放置反应，自然晾干，经火焰固定； 3)染色，滴加草酸铵结晶紫染液或亚甲蓝染液染色1分钟，水洗，吸水纸吸干水分； 4)负染，吸取一滴墨汁滴加到载玻片一侧，倾斜样品载玻片，用另一块载玻片接触墨汁并与样品载玻片成45度角，轻轻的向斜下方拉，使得墨汁覆盖染色面，最后室温自然干燥； 5)镜检，油镜观察；本发明所述的荚膜肿胀染色方法，还包括进一步的判断过程：肺炎链球菌菌体染成紫红色或蓝色，菌体外有一无色透明荚膜区，背景为黑色，菌体、背景、荚膜对比非常明显，判为阳性；肺炎链球菌菌体染成紫红色或蓝色，菌体外无法看到透明的荚膜区，黑色背景与菌体相连，即为荚膜肿胀阴性对照。
所属类别：	发明专利