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原文传递一种获取植物木质部的方法

专利名称：	一种获取植物木质部的方法
摘要：	本发明公开了一种获取植物木质部的方法。它是将含有木质部的植物组织采用直接液氮速冻后半包埋方式获得冰冻切片，再用激光显微切割方法获取其中的木质部。本发明通过冰冻切片和激光显微切割技术相结合，成功的分离到黄梁木的纯的木质部组织。本发明公开的方法相比于前人的木质部细胞获得方法定位更加精确，细胞同质性较高，为进一步研究木质部的分子生物学及基因组学研究奠定基础。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	华南农业大学
发明人：	彭昌操;张建霞;郑丹菁;王雪;董甜甜;龙健梅
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-12-27T00:00:00+0800
申请号：	CN201910889237.2
公开号：	CN110618018A
代理机构：	广州科粤专利商标代理有限公司
代理人：	刘明星;朱聪聪
分类号：	G01N1/42(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	510642 广东省广州市天河区五山华南农业大学
主权项：	1.一种获取植物木质部的方法，其特征在于，将含有木质部的植物组织采用直接液氮速冻后半包埋方式获得冰冻切片，再用激光显微切割方法获取其中的木质部。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的植物为黄粱木。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述的含有木质部的植物组织是试管苗移栽后三月龄幼苗的茎节。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的含有木质部的植物组织采用直接液氮速冻后半包埋方式获得冰冻切片，包括将含有木质部的植物组织进行预处理、包埋、切片，粘片与脱水的步骤。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的将含有木质部的植物组织进行预处理是首先卡诺氏固定液固定植物组织，然后用质量分数15～25％蔗糖PBS溶液保护材料，再用液氮速冻材料30～60s。 6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的包埋为半包埋方式，只对材料接触样品陀的部分进行包埋，所用的包埋剂为OTC包埋剂。 7.根据权利要求2、3或4所述的方法，其特征在于，所述的冰冻切片厚度为14μm-18μm。 8.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的粘片是切片在滴有无水酒精的聚乙烯萘的RNase-free膜玻片上粘片。 9.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述的脱水条件是将玻片放在装有无菌二氧化硅的切片盒中干燥10-20min。 10.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的激光显微切割采用的是LeicaASLMD7000激光显微切割系统，在5-10倍物镜下，所使用的激光参数为：power(能量)37-46，Aperture(孔径)1-8，Speed(速度)6-7，Head Current(发射强度)100％，Pulse Frequency(脉冲频率)1101。
所属类别：	发明专利