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一种茶树精油抗菌机制的研究方法
| 专利名称： | 一种茶树精油抗菌机制的研究方法 |
| 摘要： | 本发明公开了一种茶树精油抗菌机制的研究方法，本发明属于精油抗菌技术领域，包括以下步骤：扫描电镜观察菌体细胞膜的变化；茶树精油处理前后对菌体胞内大分子物质的影响；倒置荧光显微镜观察菌体核酸的变化；茶树精油处理前后细菌DNA含量的变化；茶树精油处理前后细菌蛋白质含量的变化。本发明提供的方法较为简单高效，能够直观准确的反映茶树精油的抗菌机制，为茶树精油进一步的应用提供理论基础。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 安徽;34 |
| 申请人： | 安徽大学 |
| 发明人： | 宋吉明;吴江敏;朱泽华;方晶;董庄庄 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-09-16T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-12-31T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910872377.9 |
| 公开号： | CN110632109A |
| 分类号： | G01N23/2202(2018.01);G;G01;G01N;G01N23 |
| 申请人地址： | 230601 安徽省合肥市经济开发区九龙路111号安徽大学化学化工学院 |
| 主权项： | 1.一种茶树精油抗菌机制的研究方法，具体的步骤为： 扫描电镜观察菌体细胞膜的变化，具体将茶树精油置于菌液中，使其浓度为0.5 mg/mL，然后置于37 ℃振荡培养4 h后，8000 rpm离心10 min，加入2.5%戊二醛固定3-4 h，菌体用50%、70%、80%、90%、100%乙醇溶液梯度脱水各处理15 min，最后用乙酸异戊酯置换30min，干燥喷金后扫描。 2.茶树精油处理对菌胞内大分子物质的影响，将培养至对数期的菌液高速离心10min，清洗3次并重悬，分别向内添加茶树精油，使其浓度分别为1/4MIC、1/2MIC、MIC、2MIC，在37 ℃振荡培养4 h，高速离心后收集上清液，利用紫外光分光光度计测定260 nm处上清液的吸光度。 3.倒置荧光显微镜观察细菌核酸的变化，具体将培养至对数期的菌液高速离心10 min并重悬，向菌液中添加茶树精油使其浓度为0.5 mg/mL，37 ℃振荡培养4 h，载玻片上滴加等体积的DAPI染色液和菌悬液样品进行暗反应10 min，使用倒置荧光显微镜观察。 4.将菌液高速离心10 min，清洗3次后加入等量磷酸盐缓冲液重悬，向菌液中添加茶树精油使其浓度为0.5 mg/mL，不添加精油的实验组作空白对照，于37 ℃振荡培养4 h，清洗3次并再次重悬，利用细菌基因组DNA提取试剂盒分别提取实验组和对照组菌体的DNA，紫外分光光度计测定260 nm处吸光度。 5.将菌液高速离心10 min，清洗3次后加入等量磷酸盐缓冲液重悬，向菌液中添加茶树精油使其浓度为0.5 mg/mL，不添加精油的实验组作空白对照，于37 ℃振荡培养0.5 h，清洗3次并再次重悬，利用蛋白质检测试剂盒分别测定实验组和对照组细菌的蛋白质含量。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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