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一种高分辨外周血染色体G带的制作方法
| 专利名称： | 一种高分辨外周血染色体G带的制作方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种高分辨外周血染色体G带的制作方法，包括(1)进行外周血白细胞计数，根据白细胞计数结果确定外周血的接种量以及培养时间；(2)将外周血步骤(1)的接种量接种到外周血细胞培养基中并按照步骤(1)中的培养时间进行培养；(3)向外周血细胞培养基中加入秋水仙素，终止培养；每5m外周血细胞培养基中加入40ug/ml的秋水仙素；(4)收取外周血细胞悬液，调节细胞悬液的浓度为1.2‑3.6×109/L；(5)将细胞悬液滴于玻片上，将玻片过火，过火时间为9‑16s；(6)过火后再进行烘烤，将烘烤后的玻片采用浓度为0.025％的胰蛋白酶进行分带处理10‑25s；(7)采用姬姆萨染料染色5min，获得具有G显带的染色体标本。本发明方法制作的外周血染色体呈长棒状，分散良好无交叉，显带清晰，带纹水平高。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 山东;37 |
| 申请人： | 济南艾迪康医学检验中心有限公司 |
| 发明人： | 唐敬龙 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-12-15T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-05-03T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201811536526.6 |
| 公开号： | CN109708935A |
| 代理机构： | 浙江杭州金通专利事务所有限公司 |
| 代理人： | 黄素萍 |
| 分类号： | G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1 |
| 申请人地址： | 250013 山东省济南市天桥区田庄东路4号2幢 |
| 主权项： | 1.一种高分辨外周血染色体G带的制作方法，包括以下步骤： (1)进行外周血白细胞计数，根据白细胞计数结果确定外周血的接种量以及培养时间； (2)将外周血步骤(1)的接种量接种到外周血细胞培养基中并按照步骤(1)中的培养时间进行培养； (3)向外周血细胞培养基中加入秋水仙素，终止培养；其中，每5m外周血细胞培养基中加入40ug/ml的秋水仙素； (4)收取外周血细胞悬液，调节细胞悬液的浓度为1.2-3.6×109/L； (5)将细胞悬液滴于玻片上，然后将玻片过火，过火时间为9-16s； (6)过火后再进行烘烤，将烘烤后的玻片采用浓度为0.025％的胰蛋白酶进行分带处理，处理时间为10-25s； (7)采用姬姆萨染料染色5min，即获得具有G显带的染色体标本。 2.根据权利要求1所述的高分辨外周血染色体G带的制作方法，其特征在于，步骤(1)中，外周血白细胞的计数方法为： 用白细胞稀释液先破坏红细胞，然后用血细胞计数板进行计数四角大方格，得出平均数N，白细胞数＝4个大方格内的白细胞(N)×10×20×106/4＝N/20×109/L。 3.根据权利要求2所述的高分辨外周血染色体G带的制作方法，其特征在于，步骤(1)中确定外周血接种量的方法为： 进行细胞计数后，以N＝20为基点，此时白细胞浓度为20/20×109/L＝1×109/L，分别设接种量为0.5ml，1.0ml，1.5ml，2.0ml，2.5ml，5个接种点观察，发现2.0ml时染色体效果最佳； 当N≤20,每5ml外周血细胞培养基内外周血的接种量为2.0ml； 当20 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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