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原文传递一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法

专利名称：	一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法
摘要：	本发明公开了一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，包括两种试剂分别为：R1试剂和R2试剂，R1试剂由咪唑、D(+)‑葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP‑K、AMP、N‑乙酰半胱氨酸、NaDP‑Na、A5‑PP、NaN3、已糖激酶和G6‑P‑DH组成，R2试剂由CAPSO free acid、D(+)‑葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3组成。本发明的试剂采用免疫抑制法，用抗人M血清抑制M亚单位，然后测定剩余的B亚单位活性，在340nm的波长下测量B亚单位活性在做相应运算即得CK‑MB活性，本试剂直接采用CKMB抗体直接反应避免了现有技术在一系列处理过程中带来的干扰，增加了监测数据的精度。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	河北艾欧路生物科技有限责任公司
发明人：	杨苏民;邹志良
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-03T00:00:00+0800
申请号：	CN201910095687.4
公开号：	CN109709325A
代理机构：	石家庄知住优创知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	王丽巧
分类号：	G01N33/573(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	050000 河北省石家庄市高新区湘江道319号026-401
主权项：	1.一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，其特征在于，包括两种试剂分别为：R1试剂和R2试剂； R1试剂由咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3、已糖激酶和G6-P-DH按照以下重量配比制成：5-10g：0.7-1.2g：0.7-1.2g：0.1-0.5g：1-5g：0.9-1.4g：1-5g：2-7g：1-5g：0.012-0.016g：0.8-1.2g：7-12ku：2-7ku； R2试剂由CAPSO free acid、D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3按照以下重量配比制成：2-7g：7-12g：20-70g：1-5g；一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，包括以下步骤： 1)R1试剂原料的测量：使用测量装置测量咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3和已糖激酶的重量，并依次加入量筒的内部搅拌混合，备用； 2)R1试剂的调试：将混合后的咪唑、D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na、A5-PP、NaN3和已糖激酶用5mol/L的NaOH/HCl溶液调节pH值至6.75，误差为±0.05； 3)R1试剂的制备：测量所需重量的G6-P-DH，并将测量后的G6-P-DH放入调节PH值后的溶剂中进行搅拌混合，制备完成，将制备完成的R1试剂放入试剂盒的内部，备用； 4)R2试剂原料的测量：使用测量装置测量足量的CAPSO free acid，使用测量装置测量足量D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3，备用； 5)R2试剂的调试：将测量好的CAPSO free acid用5mL/L的NaOH/HCl溶液调节pH值至9.00，误差为±0.05，备用； 6)R2试剂的制备：将的CAPSO free acid放入测量好的D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3进行搅拌混合，放入试剂盒的内部，备用； 7)试剂的混合：将制备好的R1试剂和R2试剂混合在一起，备用； 8)CK-MB抗体的测量：使用测量装置测量2-7mL的CK-MB抗体，备用； 9)CK-MB抗体检测：将CK-MB抗体放入R1和R2混合试剂的内部，用抗人M血清抑制M亚单位，然后测定剩余的B亚单位活性，在340nm的波长下测量B亚单位活性在做相应运算即得CK-MB活性，备用； 10)检测结果的统计：对检测的数据进行记录，并对检测结果进行直接计算，完成。 2.根据权利要求1所述的一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试1剂制备方法，其特征在于，所述D(+)-葡萄糖、二乙三胺五乙酸、亚硫酸钠、醋酸镁、ADP-K、AMP、N-乙酰半胱氨酸、NaDP-Na和A5-PP质量的误差为±0.01g。 3.根据权利要求1所述的一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，其特征在于，所述咪唑的质量的误差为±0.1g。 4.根据权利要求1所述的一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，其特征在于，所述NaN3已糖激酶和G6-P-DH的质量的误差为±0.001g。 5.根据权利要求1所述的一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，其特征在于，所述CAPSO free acid、D(+)-葡萄糖、CREATINE PHOSPHATE和NaN3的质量的误差为±0.05g。 6.根据权利要求1所述的一种测量肌酸激酶同工酶含量的改良型试剂制备方法，其特征在于，所述CK-MB抗体的质量的误差为±0.01mL。
所属类别：	发明专利