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原文传递同时可视化检测多种重金属的微阵列芯片及检测方法

专利名称：	同时可视化检测多种重金属的微阵列芯片及检测方法
摘要：	本发明提供了一种同时可视化检测多种重金属残留的微阵列芯片，所述微阵列芯片包括固定有一组检测目标物包被抗原的芯片载体，由以下方法制成：以牛血清白蛋白为空白对照，将牛血清白蛋白和检测目标物包被抗原通过微阵列芯片制备系统在芯片载体上点样操作后，于20‑37℃水浴中固定0.5‑4h即得；所述检测目标物为重金属汞、铬、镉、铅、铜、铟、锌中的任意一种或多种。还提供了利用上述微阵列芯片同时可视化检测多种重金属残留的方法。该微阵列芯片结构简单、制备工艺简单、成本低、多靶标、准确度高、灵敏度高、精密度高、检测时间短、操作简单易行，无需昂贵的检测仪器，适用于现场大规模样品的初筛。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京祥中生物科技有限公司
发明人：	李钟卉;李周敏
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-03T00:00:00+0800
申请号：	CN201811632141.X
公开号：	CN109709052A
代理机构：	南京苏高专利商标事务所(普通合伙)
代理人：	杨晓莉;肖明芳
分类号：	G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	210002 江苏省南京市秦淮区双龙街1号双龙科技园2栋6楼
主权项：	1.一种同时可视化检测多种重金属的微阵列芯片，其特征在于：所述微阵列芯片包括固定有一组检测目标物包被抗原的芯片载体，由以下方法制成：以牛血清白蛋白为空白对照，将牛血清白蛋白和检测目标物包被抗原通过微阵列芯片制备系统在芯片载体上点样操作后，于20-37℃水浴中固定0.5-4h即得；所述检测目标物为重金属汞、铬、镉、铅、铜、铟、锌中的任意一种或多种。 2.根据权利要求1所述的同时可视化检测多种重金属的微阵列芯片，其特征在于，所述检测目标物包被抗原的制备过程中，通过选择特定的螯合剂，选择性的与特定价态的重金属离子结合，再与抗体结合，从而实现不同价态的检测。 3.根据权利要求1所述的同时可视化检测多种重金属的微阵列芯片，其特征在于，所述微阵列芯片为一组由检测目标物包被抗原组成的矩阵组成，所述矩阵为的列数为3的倍数；所述的芯片载体为96孔板、384孔板、透明高聚物片基、膜或玻片。 4.一种利用权利要求1所述的微阵列芯片同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)在微阵列芯片的部分反应孔内分别加入含有不同浓度梯度的检测目标物的混合标准溶液，在剩余反应孔内分别加入待测样品溶液，继续向所有反应孔中依次加入检测目标物所对应的标记的抗体，于20～37℃环境下反应10～230min，洗涤液洗涤； (2)所有反应孔内继续加入显色剂，显色反应5～15min后，终止反应； (3)使用CCD进行图像采集，根据检测目标物包被抗原的灰度值以及标准溶液的浓度对数制作标准曲线，采用外标曲线法定量，分别计算样品溶液中检测目标物的含量。 5.根据权利要求4所述的同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于，所述的待测样本为水样、粮食、蔬菜、土壤、动物组织、茶叶或饮料。 6.根据权利要求4所述的同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于，所述的待测样品溶液的制备方法为：当待测样本为液体时，直接加入乙二胺四乙酸二钠、二乙烯三胺五乙酸、谷胱甘肽的混合溶液混匀进行螯合，用于检测。 7.根据权利要求4所述的同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述检测目标物的混合标准溶液加入体积为10～200μL；所述待测样品溶液的加入体积与混合标准标准溶液的加入体积相同；每个反应孔内加入的标记的抗体的量10～200μL；不同反应孔内加入的标记的抗体的量相同。 8.根据权利要求4所述的同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于，所述的标记的抗体为纳米材料或者生物酶标记的各个检测项目对应的抗体。 9.根据权利要求4所述的同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于，所述的洗涤液为磷酸盐缓冲液和Tris缓冲液。 10.根据权利要求4所述的同时可视化检测多种重金属的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的显色剂为生物催化剂及其底物或者化学催化剂及其底物，显色剂的加入体积为10～100μL。
所属类别：	发明专利