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原文传递一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法及应用

专利名称：	一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法及应用
摘要：	本发明属于生物传感检测技术领域，涉及一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法及应用。具体为一种基于聚(乙烯亚胺)功能化氮掺杂碳纳米点(NCDs@PEI)作为三联吡啶钌纳米片(RuNSs)共反应物的新型电化学发光(ECL)适配体传感器用于双酚A(BPA)的特异性检测。本发明中，由于PEI和NCDs对RuNSs的双重增强作用，NCDs@PEI可以作为RuNSs有效的共反应物，大大提高体系的发光效率，进而增强发光信号。为了提高RuNSs‑NCDs@PEI体系对BPA检测的选择性，我们创新性地引入了BPA适配体以构建新型ECL适配体传感器。构筑的ECL适配体传感器对BPA的线性响应范围为1.0×10‑10‑1.0×10‑4mol L‑1，检出限为3.3×10‑11mol L‑1。本发明的电化学发光适配体传感器选择性好、灵敏度高，为测定实际样品中的BPA提供了一种新型适配体传感平台。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏大学
发明人：	由天艳;刘晓红;李丽波;罗莉君;张家一
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-24T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201811579711.3
公开号：	CN109725041A
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	212013 江苏省镇江市京口区学府路301号
主权项：	1.一种双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下： (1)NCDs@PEI-rGO复合材料的制备：首先，将柠檬酸、尿素和聚乙烯亚胺PEI加入到二次水中，置于微波炉中反应，反应结束后，冷却至室温后，得到的产物再次溶于二次水，离心，得到的上层溶液，经透析，真空干燥，得到的NCDs@PEI；将NCDs@PEI溶液加入到等体积的rGO溶液中，混合超声，制备均一的NCDs@PEI-rGO溶液，放置室温备用； (2)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，在乙醇和水中超声后于空气中干燥； (3)将发光体Ru(bpy)32+的有机相溶液修饰到步骤(2)制备的玻碳电极表面，并在空气中干燥，待到钌相的有机溶剂挥发后形成RuNSs； (4)然后将NCDs@PEI-rGO的溶液修饰到步骤(3)制备的电极表面，室温下晾干； (5)在步骤(4)制备的电极上滴加全氟磺酸溶液，室温下晾干后形成膜； (6)将步骤(5)修饰好的电极浸泡在HAuCl4中，从-0.3V到-0.1V电位下进行电镀，时间控制在15s到30s内，在电极表面修饰上一层Au粒子AuPs，用于连接BPA适配体； (7)在一定温度下，将巯基功能化的BPA适配体反应在步骤(6)修饰好的电极上，通过Au-S共价键固定在电极表面；形成自组装电极； (8)在一定温度下，将步骤(7)制备的自组装电极浸入牛血清白蛋白BSA溶液中孵育，以阻断剩余的非特异性结合位点，制得基于RuNSs-NCDs@PEI的电化学发光适配体传感器。 2.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，柠檬酸、尿素、聚乙烯亚胺PEI和二次水中的用量比例为3g：3g：6g：10mL，微波炉功率为800W，反应时间为5min，NCDs@PEI溶液的浓度为2mg·mL-1，rGO溶液的浓度为2mg·mL-1，NCDs@PEI-rGO溶液的浓度为1mg·mL-1。 3.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，玻碳电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm和0.05μm。 4.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，Ru(bpy)32+的有机相溶液的浓度为0.5mmoL·L-1，用量为3μL；所述的有机溶剂为乙腈和正丙醇体积比为5:1的混合溶液。 5.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，NCDs@PEI-rGO的溶液的浓度为1mg·mL-1，用量为3μL。 6.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，全氟磺酸(Nafion)溶液的浓度为0.5wt％，用量为3μL。 7.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(6)中，HAuCl4的质量百分浓度为1％。 8.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(7)中，巯基功能化的BPA适配体的浓度为0.5～2.0μmoL·L-1，用量为3μL；反应温度为4℃，反应时间为12-18h。 9.根据权利要求1所述的双酚A电化学发光适配体传感器的制备方法，其特征在于，步骤(8)中，牛血清白蛋白BSA溶液的质量百分浓度为1％；孵育的温度为37℃，孵育的时间为10-60min。
所属类别：	发明专利