详情

原文传递一种检测饲料中己烯雌酚的酶联免疫试剂盒及其应用

专利名称：	一种检测饲料中己烯雌酚的酶联免疫试剂盒及其应用
摘要：	本发明提供了一种检测己烯雌酚的酶联免疫试剂盒，它含有：包被有己烯雌酚偶联抗原的酶标板．己烯雌酚标准品溶液，浓缩酶结合物，酶结合物工作液，底物显色液，终止液。本发明还公开了一种应用上述酶联免疫试剂盒检测样本中己烯雌酚的方法，它包括：首先进行样本前处理，然后用试剂盒进行检测，最后分析检测结果。本发明提供的酶联免疫试剂盒可用于检测饲料(原料、配合料和浓缩料)样本中己烯雌酚的残留量，其操作简便、成本低、灵敏度高、能够现场监控且适合大量样本的筛查。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏维赛科技生物发展有限公司
发明人：	洪霞;杜霞;张淑雅
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-01T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201711057842.0
公开号：	CN109752524A
分类号：	G01N33/535(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	212009 江苏省镇江市丁卯新区国家科技园B11栋3楼
主权项：	1.一种检测己烯雌酚的酶联免疫检测试剂盒，其特征在于包括有： (1)包被有己烯雌酚偶联抗原的酶标板； (2) 己烯雌酚标准品溶液； (3)浓缩酶结合物； (4)酶结合物稀释液； (5)底物显色液； (6)终止液。 2.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在于所述己烯雌酚偶联抗原是由己烯雌酚半抗原与载体蛋白偶联得到，所述己烯雌酚半抗原结构如下：。 3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于所述己烯雌酚半抗原的制备方法主要包括如下步骤： 1)取20 mg己烯雌酚，10ul，1，3-丙二胺，催化量的4-二甲氨基吡啶溶解于2ml N，N’-二甲基甲酰胺中，得到I液； 2)取20mg N，N’-二环己基碳二亚胺溶解于0.5mlDMF中，得到II液； 3)在0℃条件下，将II液缓慢滴加至I液中，恢复室温后，继续反应20 h； 4)蒸除溶剂，柱层析(洗脱液：二氯甲烷／甲醇，体积比20：1)，得到己烯雌酚半抗原。 4.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在于所述的浓缩酶结合物为酶标记的己烯雌酚单克隆抗体。 5.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在于所述浓缩酶结合物的标记酶为辣根过氧化物酶；酶结合物是采用过碘酸钠法将酶标记物与抗体偶联得到。 6.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在于：所述的终止液为1~2mol/L的硫酸或盐酸溶液，所述底物显色液由底物液A液和底物液B液组成，底物液A液为过氧化脲溶液，底物液B液为四甲基联苯胺溶液。 7.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在于所用包被缓冲液为PH9.6，0.1mol/L碳酸盐缓冲液，所用封闭液为PH7.2~7.4，0.5%~1%牛血清白蛋白，0.1mol/L磷酸盐缓冲液，所述百分比为重量百分比。 8.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在于所述的酶结合物稀释液为PH7.2~7.4，含0.5%~1%牛血清白蛋白，0.1mol/L的磷酸盐缓冲液，所述百分比为重最百分比。 9.如权利要求l所述的试剂盒，其特征在r所述己烯雌酚标准品溶液浓度分别为0ug/L、1ug/L、3ug/L、9ug/L、27ug/L、81ug/L。 10.一种检测样品中己烯雌酚含量的方法，主要步骤包括： 1)将待测样品进行前处理； 2)用权利要求1—9任意一项所述的酶联免疫试剂盒进行检测； 3)分析检测结果。
所属类别：	发明专利