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原文传递一种磁性微球及其制备方法以及微生物的检测方法

专利名称：	一种磁性微球及其制备方法以及微生物的检测方法
摘要：	本发明涉及微生物检测领域，具体而言，涉及一种磁性微球及其制备方法以及微生物的检测方法。一种磁性微球，包括微球本体，所述微球本体携带负电荷；吸附在所述微球本体外表面的携带正电荷的PEI。本发明提供的磁性微球能有效吸附样品中的微生物，特异性强，吸附较为紧密，降低其他杂质的干扰，通过检测拉曼信号使得不同微生物得以区分，该检测方法大大缩短检测时间，方法便捷可靠，准确率均为96％以上，为临床血液感染的诊断和治疗提供一种新颖、快速的检测方式。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国人民解放军军事科学院军事医学研究院
发明人：	肖瑞;汪崇文;李佳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910049833.X
公开号：	CN109781702A
代理机构：	北京超凡志成知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	范彦扬
分类号：	G01N21/65(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	100000 北京市海淀区太平路27号院东门
主权项：	1.一种磁性微球，其特征在于，包括微球本体，所述微球本体携带负电荷；吸附在所述微球本体外表面的携带正电荷的PEI；进一步地，所述微球本体为磁性Fe3O4颗粒；进一步地，所述Fe3O4颗粒的粒径为200±20nm；进一步地，所述PEI的分子量为25±2kDa。 2.权利要求1所述的磁性微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：微球本体与PEI在溶剂中超声处理50-70min，洗涤，得到所述磁性微球；进一步地，所述微球本体在溶剂中的浓度为4-6g/L，所述PEI在溶剂中的浓度为4-6g/L；进一步地，所述溶剂为水；进一步地，所述洗涤采用双蒸水进行。 3.一种微生物的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：权利要求1所述的磁性微球吸附待检测物，检测拉曼信号，根据拉曼信号的峰值判断待检测物的微生物种类；所述待检测物为含有携带有负电荷的微生物的样品。 4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述待检测物为病原体；进一步地，所述病原体包括金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌中的任一种或多种；进一步地，所述待检测样品为血液样品。 5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述待检测样品与磁性微球混合，使得磁性微球吸附待检测物；进一步地，混合后进行孵育，孵育过程中轻轻摇晃，孵育时间为15-20min。 6.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，所述待检测样品中目标菌体含量为101CFU/mL-103CFU/mL；进一步地，104CFU菌体所需的磁性微球的重量为0.1mg。 7.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，在硅晶片上检测拉曼信号。 8.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，使用正交偏最小二乘判别分析区分耐药菌和非耐药菌；进一步地，耐药菌和非耐药菌的检测还包括在药敏培养板上培养以确认是否耐药。 9.根据权利要求3-8任一项所述的检测方法，其特征在于，检测拉曼信号前还包括加入增强信号物质的步骤；进一步地，所述增强信号物质包括纳米银颗粒、胶体金、金核银壳中的任一种。 10.一种微生物检测试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的磁性微球；进一步地，所述检测试剂盒还包括硅晶片、增强信号物质、磁体中的任一种或多种；进一步地，所述增强信号物质包括纳米银颗粒、胶体金、金核银壳中的任一种。
所属类别：	发明专利