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原文传递一种用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法

专利名称：	一种用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法
摘要：	本发明公开了一种用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，包含以下步骤：（1）将新鲜的蚯蚓清洗干净后冷却，然后与预冷后的磷酸盐缓冲溶液进行匀浆，得到蚯蚓血清酶液；（2）将新鲜的黄鳍鲷去骨、去皮，得到其肌肉组织，然后与预冷后的磷酸盐缓冲溶液进行匀浆，得到黄鳍鲷肌肉组织酶液；（3）取蚯蚓血清酶液和黄鳍鲷肌肉组织酶液，将两种酶液混合，加入TritonX‑114或TritonX‑100，再添加稳定剂和磷酸盐缓冲溶液制得混合酶液；（4）将步骤（3）制得的混合酶液在35～37℃的条件下加热，然后冷却至室温，并使用离心机离心，离心后取上清液，得到复配酶液。该复配酶液为乙酰胆碱酯酶复配酶液，酶源丰富，提取简单，可有效缩短乙酰胆碱酯酶的制备时间和生产成本。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东省食品工业研究所有限公司
发明人：	李绮敏;庄俊钰;冯志强;林丹;许银叶;钟肖琼;廖玮;张家意;王莹;林涵梅;龚晓莹
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910044335.6
公开号：	CN109781718A
代理机构：	广州知友专利商标代理有限公司
代理人：	李海波
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	511442 广东省广州市番禺区南村镇新基村
主权项：	1.一种用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：（1）将新鲜的蚯蚓清洗干净后冷却，然后与预冷后的磷酸盐缓冲溶液进行匀浆，得到蚯蚓血清酶液；（2）将新鲜的黄鳍鲷去骨、去皮，得到其肌肉组织，然后与预冷后的磷酸盐缓冲溶液进行匀浆，得到黄鳍鲷肌肉组织酶液；（3）取步骤（1）制得的蚯蚓血清酶液和步骤（2）制得的黄鳍鲷肌肉组织酶液，将两种酶液混合，加入TritonX-114或TritonX-100，再添加稳定剂和磷酸盐缓冲溶液制得混合酶液；（4）将步骤（3）制得的混合酶液在35～37℃的条件下加热，然后冷却至室温，并使用离心机离心，离心后取上清液，得到复配酶液。 2.根据权利要求1所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，所述步骤（1）中，蚯蚓与磷酸盐缓冲溶液以质量比1:1～1:4的比例进行匀浆；所述步骤（2）中，黄鳍鲷肌肉组织与磷酸盐缓冲溶液以质量比1:1～1:4的比例进行匀浆。 3.根据权利要求2所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述的混合酶液中，蚯蚓血清酶液的含量为5.0～20.0g/L；黄鳍鲷肌肉组织酶液的含量为10.0～50.0g/L。 4.根据权利要求1所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，步骤（3）所述的稳定剂为丙三醇。 5.根据权利要求4所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，步骤（3）中TritonX-114或TritonX-100的添加量为0.02～0.10%，w/v；丙三醇的添加量为2.5～10%，w/v。 6.根据权利要求5所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，步骤（4）混合酶液的加热过程中，使用水浴加热10～30min。 7.根据权利要求6所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，步骤（4）所述的离心速度为5000～12000r/min，离心过程的温度为0～4℃，离心时间为10～30min。 8.根据权利要求1～7任一项所述的用于快速检测农药残留的复配酶液的制备方法，其特征在于，所述的磷酸盐缓冲溶液的pH值为7.5～8.0。
所属类别：	发明专利