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原文传递检测孕酮的时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条

专利名称：	检测孕酮的时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条
摘要：	本发明涉及孕酮快速时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条制备方法及其应用。该试纸条由Fusion5膜、硝酸纤维素膜和吸水纸三部分组成，通过竞争法原理，利用时间分辨荧光微球作为免疫标记物，对待测抗原进行准确快速的定量检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	镇江亿特生物科技发展有限公司
发明人：	洪霞;杜霞;张淑雅
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201711150978.6
公开号：	CN109813889A
分类号：	G01N33/533(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	212009 江苏省镇江市新区丁卯经十二路668号
主权项：	1.孕酮快速时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条，其特征在于：包括Fusion5膜、硝酸纤维素膜以及吸水纸三部分，硝酸纤维素膜位于中间，Fusion5膜与吸水纸分别搭接于硝酸纤维素膜左右两端，Fusion5膜上有加样区和微球区，微球区上载有孕酮单克隆抗体时间分辨荧光微球；硝酸纤维素膜上有检测线和质控线，检测线上包被孕酮抗原，质控线上包被抗兔抗体。 2.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于：所述时间分辨荧光微球包括检测微球和质控微球，检测微球为表面包被有孕酮单抗的荧光微球，质控微球为表面包被有兔抗标记蛋白的荧光微球。 3.如权利要求1或2所述的试纸条，其特征在于：所述时间分辨荧光微球的粒径范围为100 - 1000 nm 。 4.如权利要求1所述的试纸条，其特征在于：所述检测线上包被孕酮检测用抗原为孕酮与载体物质形成的偶合物；检测线上包被二抗 - 抗兔抗体。 5.如权利要求1所述的试纸条的制备方法，其制备步骤如下： ⑴. 质控微球制备： ① 用生物素标记蛋白； ② 采用上述标记蛋白包被醛基修饰的荧光微球； ⑵. 检测微球制备：采用孕酮的单抗包被醛基修饰的荧光微球； ⑶. 空白大卡粘贴：将硝酸纤维素膜粘贴在塑料底板中间，Fusion5膜与吸水纸分别搭接于硝酸纤维素膜左右两端； ⑷. 喷膜：将兔抗标记蛋白的荧光微球和孕酮单抗的荧光微球采用释放缓冲液混合稀释到一定浓度，喷到Fusion5膜的微球区；孕酮抗原和抗兔抗体稀释后，分别喷到硝酸纤维素膜的T线和C线位置； ⑸ 干燥及切条。 6.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤⑷中释放缓冲液组成为10 - 15%蔗糖、3 - 10%海藻糖、0. 5 - 1% N，O-双三甲硅基乙酰胺（BSA）、0.1 - 0.5%庆大霉素。 7.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤⑷稀释后检测微球终浓度为0.5 -3mg/mL，质控微球终浓度0.05 - 0.3 mg/mL；T线抗原终浓度0.5 - 3mg/mL，C线抗原终浓度0. 5 - 3 mg/mL；C，T线喷膜液量为0.5 - 1.5 μ1/cm，微球喷膜量为2 - 10 μl/cm。 8.如权利要求5所述的制备方法，其特征在于：步骤⑸中烘干条件为37℃烘干12 - 16 小时。 9.如权利要求5权利要求所述的孕酮快速时间分辨荧光免疫层析定量检测试纸条，其特征在于：试纸条底部设有塑料底板。 10.如权利要求1所述的试纸条的应用，其特征在于：该试纸条用于采用竞争法模式的免疫层析的定量检测。
所属类别：	发明专利