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原文传递墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法

专利名称：	墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法和检测方法
摘要：	本发明涉及一种墨旱莲药材UPLC特征图谱构建方法和检测方法。该特征图谱构建方法包括以下步骤：分别以蟛蜞菊内酯和4,5‑二‑O‑咖啡酰奎宁酸为对照品制备对照品参照物溶液；以墨旱莲对照药材制备对照药材参照物溶液；分别取墨旱莲药材和标准汤剂样品，加提取溶剂提取，过滤，所得滤液作为供试品溶液和标准汤剂供试品溶液；分别吸取所述参照物溶液、供试品溶液、标准汤剂供试品溶液，注入超高效液相色谱仪，测定；比较所得供试品图谱与标准汤剂供试品图谱，标定8个水溶性成分的特征峰，获得墨旱莲药材的UPLC特征图谱。该特征图谱能用于定性、定量分析墨旱莲药材的质量，能够确保采用该药材制备的墨旱莲传统汤剂的质量，也适用于检测含墨旱莲的其它制剂。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东一方制药有限公司
发明人：	朱德全;王闽予;魏梅;程学仁;彭致铖;何民友;李国卫;陈康梅;陈向东
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-31T00:00:00+0800
申请号：	CN201811570716.X
公开号：	CN109828040A
代理机构：	广州华进联合专利商标代理有限公司
代理人：	曾银凤
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	528251 广东省佛山市南海区里水镇旗峰工业开发区
主权项：	1.一种墨旱莲药材UPLC特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：参照物溶液的制备：分别以蟛蜞菊内酯和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；向墨旱莲对照药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液，将所述提取液滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；供试品溶液的制备：向墨旱莲药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液I，将所述提取液I滤过，取续滤液作为供试品溶液I；向墨旱莲标准汤剂样品中加入提取溶剂，加热回流，得提取液II，将所述提取液II滤过，取续滤液作为供试品溶液II；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、供试品溶液I和供试品溶液II注入超高效液相色谱仪中测定，标定水溶性共有峰，即得墨旱莲药材UPLC特征图谱。 2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为三乙胺磷酸缓冲液，所述三乙胺磷酸缓冲液以水为溶剂，包含体积分数为0.5％-0.6％的磷酸和体积分数为0.7％-0.83％的三乙胺，梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为： 0-3min，流动相A由体积分数为11％升高到16％，流动相B由体积分数为89％降低到84％； 3min-9min，保持流动相A体积分数为16％，保持流动相B体积分数为84％； 9min-20min，流动相A由体积分数为16％升高到20％，流动相B由体积分数为84％降低到80％； 20min-34min，保持流动相A体积分数为20％，保持流动相B体积分数为80％； 34min-40min，流动相A由体积分数为20％升高到80％，流动相B由体积分数为80％降低到20％； 40min-41min，流动相A由体积分数为80％降低到11％，流动相B由体积分数为20％升高到89％； 41min-50min，流动相A保持体积分数为11％，流动相B保持体积分数为89％。 3.根据权利要求2所述的构建方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：柱温28℃-32℃，流速为每分钟0.28mL-0.32mL，检测波长为254nm-360nm。 4.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，所述提取溶剂为体积分数为60％-80％的甲醇水溶液，用量为每1g墨旱莲药材加入50mL-100mL。 5.根据权利要求1-4任一项所述的构建方法，其特征在于，所述加热回流的时间为60min-90min。 6.一种墨旱莲药材的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：参照物溶液的制备：分别以蟛蜞菊内酯和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸为对照品，加溶剂溶解，制备对照品参照物溶液；向墨旱莲对照药材中加入提取溶剂，加热回流，得提取液，将所述提取液滤过，取续滤液作为对照药材参照物溶液；待测样品溶液的制备：向待测样品中加入提取溶剂，加热回流，得提取液III，将所述提取液III滤过，取续滤液作为待测样品溶液；测定：将所述对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液、待测样品溶液注入超高效液相色谱仪中测定，即可。 7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件包括：固定相：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱；流动相：流动相A为乙腈，流动相B为三乙胺磷酸缓冲液，所述三乙胺磷酸缓冲液以水为溶剂，包含体积分数为0.5％-0.6％的磷酸和体积分数为0.7％-0.83％的三乙胺，梯度洗脱；所述梯度洗脱具体为： 0-3min，流动相A由体积分数为11％升高到16％，流动相B由体积分数为89％降低到84％； 3min-9min，保持流动相A体积分数为16％，保持流动相B体积分数为84％； 9min-20min，流动相A由体积分数为16％升高到20％，流动相B由体积分数为84％降低到80％； 20min-34min，保持流动相A体积分数为20％，保持流动相B体积分数为80％； 34min-40min，流动相A由体积分数为20％升高到80％，流动相B由体积分数为80％降低到20％； 40min-41min，流动相A由体积分数为80％降低到11％，流动相B由体积分数为20％升高到89％； 41min-50min，流动相A保持体积分数为11％，流动相B保持体积分数为89％。 8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述超高效液相色谱的色谱条件还包括：柱温28℃-32℃，流速为每分钟0.28mL-0.32mL，检测波长为254nm-360nm。 9.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述提取溶剂为体积分数为60％-80％的甲醇水溶液，用量为每1g墨旱莲药材加入50mL-100mL。 10.根据权利要求6-9任一项所述的检测方法，其特征在于，所述加热回流的时间为60min-90min。
所属类别：	发明专利