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原文传递一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置及其应用

专利名称：	一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置及其应用
摘要：	本发明公开了一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置及其应用，包括一底座、一托盘、不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具和一光滑玻璃板；上述托盘通过底座的上开口置于底座的盒体的内腔，光滑玻璃板置于托盘上，上述若干制孔模具的至少之一盖设于盒体的上开口，以通过若干圆柱状凸起在上述凝胶上形成若干加样孔。本发明的监测装置能够重复使用，所制得的加样孔的底部均一，边缘圆润，且尺寸一致性好。本发明的监测方法操作简单，特别适合于适体筛选过程中检测候选适体的富集情况，且无需标记，检测快捷，易于推广。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	福建;35
申请人：	华侨大学
发明人：	林俊生;张伟;郑志发;刘清秀;吴莉婷
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-04T00:00:00+0800
申请号：	CN201910051029.5
公开号：	CN109839499A
代理机构：	厦门市首创君合专利事务所有限公司
代理人：	张松亭;姜谧
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	361000 福建省泉州市丰泽区城东城华北路269号
主权项：	1.一种核酸适配体与其靶标相结合的监测装置，其特征在于：包括一底座，为一具有上开口的盒体，其底板的两侧分别具有一沿底板所在平面向外延伸的压板；一托盘，其形状尺寸适配盒体的上开口，其两端的边缘分别向上形成二侧壁；不同尺寸且可相互组合或替换的若干制孔模具，每一制孔模具均包括一顶板，该顶板的下表面为光滑的，该下表面向下凸设阵列分布、表面光滑且尺寸相同的若干圆柱状凸起；一光滑玻璃板，其尺寸与托盘的尺寸适配，以于盒体内承托凝胶；上述托盘通过底座的上开口置于底座的盒体的内腔，光滑玻璃板置于托盘上，上述若干制孔模具的至少之一盖设于盒体的上开口，以通过若干圆柱状凸起在上述凝胶上形成若干加样孔。 2.如权利要求1所述的监测装置，其特征在于：所述盒体的内腔的长度为81-243mm，宽度为26-78mm，高度为8-15mm。 3.如权利要求2所述的监测装置，其特征在于：所述托盘的长度比所述盒体的内腔的长度短0.5-1mm，所述托盘的宽度比所述盒体的内腔的宽度短0.5-1mm。 4.如权利要求2所述的监测装置，其特征在于：所述托盘的二侧壁的高度比所述盒体的内腔的高度长10-20mm。 5.如权利要求1所述的监测装置，其特征在于：所述圆柱状凸起的高度为2-8mm，直径为0.9-3mm。 6.一种用权利要求1至5中任一权利要求所述的监测装置进行监测的方法，其特征在于：包括如下步骤： (1)将所述托盘置于所述底座的盒体的内腔，在所述托盘上放置光滑玻璃板，向所述底座的盒体的内腔中倒入加入了核酸染料进行预染的凝胶溶液，然后盖上所述若干制孔模具的至少之一，待凝胶溶液凝固后，撤去所述若干制孔模具的至少之一，凝胶上形成若干阵列分布分布的若干加样孔； (2)在所述若干加样孔中分别加入经预处理的适体、对应的靶标样品和对照，进行面对面扩散，即适体和靶标样品以及对照存在相互的扩散，且扩散期间保持凝胶的胶面与水平面平行，其中加入适体的加样孔位于加入靶标样品的加样孔和加入对照的加样孔的连线的中点； (3)对凝胶进行成像，然后利用图片分析软件分别测量适体扩散的最外圈与加入靶标样品的加样孔的中心的第一距离以及与加入对照的加样孔的中心的第二距离，用第一距离除以第二距离，当结果大于1或出现核酸沉淀线时，表示监测到适体与靶标样品有结合。 7.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述凝胶溶液由所述适体和靶标的结合缓冲液配制而成。 8.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述核酸染料为单链DNA或RNA着色染料。 9.如权利要求6所述的方法，其特征在于：所述预处理为：将适体在70-96℃保温8-12min后，缓慢降至室温或者直接冰浴使其形成空间构象。
所属类别：	发明专利