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原文传递一种光致电化学体系及检测DNA的方法

专利名称：	一种光致电化学体系及检测DNA的方法
摘要：	本发明属于分析化学与光致电化学传感器领域，具体涉及一种光致电化学体系及检测DNA的方法。氯化血红素hemin和G4联体形成的复合物在电极上产生光致电化学信号，构建了一种新的G4‑hemin光致电化学体系；然后，使用胶体金对电极进行修饰，形成一层胶体金膜，然后在电极表面固定发卡结构DNA来捕获目标DNA，当有目标DNA时，含G4体结构的发卡H1和H2通过杂交链式反应在电极表面形成含G4体的DNA复合体，然后加入hemin，hemin与G4体形成hemin‑G4复合物，以G4‑hemin为光致电化学体系产生的信号实现对目标DNA的测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛科技大学
发明人：	混旭;李得恩;张跃;赵继宽;钟华;张嵩岩
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910208019.8
公开号：	CN109856225A
分类号：	G01N27/416(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	266000 山东省青岛市崂山区松岭路99号
主权项：	1.一种光致电化学体系，包括如下步骤：将hemin与G4体孵育形成hemin-G4复合物，hemin-G4复合物修饰电极，该hemin-G4复合物具有光致电化学性能。 2.一种利用权利要求1所述的一种光致电化学体系检测DNA的方法，包括如下步骤： (1)修饰电极的制备及DNA测定 a.将实验所用的DNA进行稀释； b.将胶体金溶液滴涂在电极上，放置在室温下至溶液干掉，在电极表面形成一层胶体金膜，得胶体金修饰电极，用于在电极表面固定捕获DNA； c.取捕获DNA溶液于小离心管中，加入TCEP(三(2-羧乙基)膦盐酸盐)溶液，反应5-180分钟后，取部分溶液滴在胶体金修饰电极上，37℃条件下反应2-48小时；再将电极插入含巯基乙胺溶液的小离心管中5-180分钟； d.取出电极，并用磷酸缓冲溶液冲洗电极； e.取H1和H2溶液混合均匀，水浴95℃下孵育五分钟，自然冷却至室温； f.取含目标DNA的溶液滴于上述d所得电极表面，37℃条件下反应5-360分钟后，将电极用磷酸缓冲溶液冲洗； g.将上述e所得的H1和H2的混合液滴于上述f所得电极表面，37℃条件下反应5-180分钟，并用磷酸缓冲溶液冲洗电极； h.将电极插入含hemin溶液的小离心管中5-180分钟，再用磷酸缓冲溶液冲洗电极，然后进行光致电化学信号检测；实验所用的DNA序列如下，方向从左到右为5`-3` 目标DNA：CTTATGTAATGAGACAGTGTTATGAGCT 捕获DNA：TCATTACTAAG-SH H1：TTATGAGCTATATTGAAACAGCTCATAACACTGTCTGAGGGTAGGG C GGG TTG G GT H2：TGGGTTGGGCGGGATGGGGTTTCAATATAGCTCATAATCAGACAGT GTTA TGAG C T G4：TGGGTTGGGCGGGATGGG (2)光致电化学电信号测定将电化学工作站开启，50s后打开LED灯，每10s开关一次LED灯，将电极插入磷酸缓冲溶液中，采用三电极系统，记录光致电化学信号，实现对目标物DNA的检测；由于上述方法制备的电极可以检测DNA，因此，本发明提供了上述的光致电化学体系在检测DNA含量中的应用；由于上述的一种光致电化学体系和一种光致电化学体系检测DNA的方法可以检测DNA，因此，本发明提供了上述的一种光致电化学体系和一种光致电化学体系检测DNA的方法在检测DNA含量中的应用。
所属类别：	发明专利