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原文传递 痕量蛋白检测反应底物及痕量蛋白的快速检测方法
专利名称: 痕量蛋白检测反应底物及痕量蛋白的快速检测方法
摘要: 痕量蛋白检测反应底物及痕量蛋白的快速检测方法,它涉及一种痕量蛋白检测反应底物及痕量蛋白的检测方法。本发明的目的是为了解决现有蛋白快速检测方法中检出限高的技术问题,为其提供了一种痕量蛋白检测反应底物及痕量蛋白的快速检测方法。本发明痕量蛋白检测反应底物由考马斯亮蓝G250粉末、浓度为95%的乙醇、磷酸和三蒸水制成。本发明方法可用于浓度仅为0.5~20mg/L的痕量蛋白检测,检测过程用时短、检测数据准确、稳定性高。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 河北;13
申请人: 周晓辉
发明人: 周晓辉;卢天华;刘军
专利状态: 有效
申请日期: 2019-02-19T00:00:00+0800
发布日期: 2019-06-07T00:00:00+0800
申请号: CN201910121733.3
公开号: CN109856070A
代理机构: 哈尔滨市文洋专利代理事务所(普通合伙)
代理人: 范欣
分类号: G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址: 050000 河北省石家庄市裕华区裕华东路186号
主权项: 1.痕量蛋白检测反应底物,其特征在于500mL痕量蛋白检测反应底物由0.05g考马斯亮蓝G250粉末、25mL浓度为95%的乙醇、65mL磷酸和余量的三蒸水制成。 2.痕量蛋白检测方法,其特征在于痕量蛋白检测方法按照以下步骤进行: 一、配制梯度标准蛋白液,梯度标准蛋白液分为N个浓度,梯度标准蛋白液中蛋白的浓度最小为0mg/L、蛋白的浓度最大为20mg/L~30mg/L; 二、将痕量蛋白待测样品制成溶液; 三、将步骤一配制的各浓度的梯度标准蛋白液与痕量蛋白待测样品溶液等体积分别加入酶标板,然后加入权利要求1痕量蛋白检测反应底物,避光静置反应10~30分钟,再将酶标板置于酶标仪中,在560nm~610nm下检测反应溶液的吸光值; 四、获得标准曲线公式: 梯度标准蛋白液中蛋白浓度为0mg/L样品测得的吸光值称为本底,其余浓度梯度标准蛋白液测得的吸光值减去本底获得各自对应的标准吸光值;以标准吸光值为纵坐标,梯度标准蛋白液浓度为横坐标,绘制标准曲线散点图,得到标准曲线公式; 五、痕量蛋白待测样品吸光值减去本底后获得相对吸光值,将相对吸光值带入标准曲线公式,计算得到痕量蛋白待测样品的蛋白含量。 3.根据权利要求2所述痕量蛋白检测方法,其特征在于步骤一中N为4~12的自然数。 4.根据权利要求2所述痕量蛋白检测方法,其特征在于步骤三中痕量蛋白检测反应底物与待测样品溶液的体积比为1:1。 5.根据权利要求2所述痕量蛋白检测方法,其特征在于步骤三中痕量蛋白检测反应底物的体积为60~140μL。 6.根据权利要求2所述痕量蛋白检测方法,其特征在于步骤三中痕量蛋白检测反应底物的体积为100~130μL。 7.根据权利要求2所述痕量蛋白检测方法,其特征在于步骤三中在595nm下检测反应溶液的吸光值。 8.根据权利要求2所述痕量蛋白检测方法,其特征在于步骤三中避光静置反应15分钟。
所属类别: 发明专利
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