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原文传递一种检测猴IL-18的酶联免疫试剂盒

专利名称：	一种检测猴IL-18的酶联免疫试剂盒
摘要：	一种检测猴IL‑18的双抗夹心酶联免疫试剂盒，包括由捕获抗体包被的酶标板、检测抗体、稀释液、浓缩洗涤液、偶联物、显色液、终止液和标准品；其中，捕获抗体为IL‑18的单克隆抗体；检测抗体为生物素标记的IL‑18多克隆抗体；稀释液为0.5～4%干酪素钠的pH7.4磷酸缓冲液；捕获抗体包被在酶标板上，以质量分数1～5%牛血清白蛋白的pH7.4磷酸缓冲液作为封闭液进行抗体封闭；标准品为IL‑18蛋白。本发明采用三明治法半定量ELISA的检测样品的IL‑18的水平，检测方法操作简单，结果准确度高，能够检测大批量的样品。适用于科研领域非临床诊断目的的针对猴IL‑18的特异性检测，有很大的推广应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东云天抗体生物科技有限公司
发明人：	毕利军;朱国峰;张晓莉;温姌婷;姚青青;李燕;黄健乐;苏欣莹
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-11T00:00:00+0800
申请号：	CN201811647624.7
公开号：	CN109870570A
代理机构：	广州粤高专利商标代理有限公司
代理人：	冯振宁
分类号：	G01N33/543(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	528315 广东省佛山市顺德区乐从镇岭南大道南2号A栋6层621室
主权项：	1.一种检测猴IL-18的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，包括由捕获抗体包被的酶标板、检测抗体、稀释液、浓缩洗涤液、偶联物、显色液、终止液和标准品；其中，捕获抗体为IL-18的单克隆抗体；检测抗体为生物素标记的IL-18多克隆抗体；稀释液为0.5～4%干酪素钠的pH7.4磷酸缓冲液；捕获抗体包被在酶标板上，以质量分数1～5%牛血清白蛋白的pH7.4磷酸缓冲液作为封闭液进行抗体封闭；标准品为IL-18蛋白。 2.根据权利要求1所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，捕获抗体包被在酶标板上，包括以下步骤： S11. 用pH9.4磷酸盐缓冲液将捕获抗体稀释，加入酶标板，预包被； S12. 用含有体积分数0.01～0.2%吐温20的pH7.4的PBS洗涤S11包被后的ELISA酶标板； S13. 拍干，加入封闭液，封闭； S14. 拍干，干燥，真空包装，保存。 3.根据权利要求1所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，捕获抗体的包被浓度为0. 5～4μg/ml，包被量为50～300μL。 4.根据权利要求3所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，捕获抗体的包被浓度为1g/ml，包被量为100μL。 5.根据权利要求1所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，检测抗体的使用浓度为0.25～2μg/ml，使用量为50～300μL。 6.根据权利要求5所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，检测抗体的使用浓度为0.5μg/ml，使用量为50μL。 7.根据权利要求1所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，浓缩洗涤液为含有体积分数0.01～0.2%的吐温的pH7.4的磷酸盐缓冲液，工作浓度需要稀释20倍。 8.根据权利要求1所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒，其特征在于，偶联物为辣根过氧化酶标记的链霉亲和素；显色液为四甲基联苯胺；终止液为硫酸。 9.权利要求1～8任一所述的双抗夹心酶联免疫试剂盒的使用方法，包括以下步骤： S21. 向酶标板，加入检测抗体； S22. 将用稀释液梯度稀释的标准品和待测样本分别加入对应的孔内，振荡混匀，室温孵育； S23. 用洗涤液洗涤酶标板； S24. 加入偶联物，振荡混匀，室温孵育； S25. 用洗涤液洗涤酶标板； S26. 加入显色液，振荡混匀，室温避光显色； S27. 加入终止液，终止反应； S28. 分别检测450nm及620nm的OD值，计算其差值； S29. 以OD450与OD620的差值为纵坐标，以标准品的浓度为横坐标，得到标准曲线和线性回归方程式； S210. 将待测样本的OD450与OD620的差值带入线性回归方程式，计算其浓度。 10.根据权利要求9所述的使用方法，其特征在于，标准品或待测样本的量为50～300μL/孔。
所属类别：	发明专利