详情

原文传递基于免疫法分选ApoE蛋白的微流控芯片及其分选方法

专利名称：	基于免疫法分选ApoE蛋白的微流控芯片及其分选方法
摘要：	本发明揭示了一种基于免疫法分选ApoE蛋白的微流控芯片，由基片和盖片夹持构成独立的腔体分别为样本池、缓冲液池、捕获区和废液池，由基片和盖片夹持构成独立的通道，其中三个通道一端分别连通样本池、缓冲液池和捕获区的一端，所述三个通道的另一端交汇连通，所述捕获区的另一端通过通道连通废液池。本发明通过微流控技术控制待测样品的流速和流量，从而减少误差，增加反应灵敏度，并且操作简单、检测时间短、储存简单，易推广使用，节约了成本。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州睿辰生物科技有限公司
发明人：	周辉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-20T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-11T00:00:00+0800
申请号：	CN201910126434.9
公开号：	CN109870567A
代理机构：	芜湖安汇知识产权代理有限公司
代理人：	朱圣荣
分类号：	G01N33/53(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510000 广东省广州市广州高新技术产业开发区科学城开源大道11号B10栋3层306房
主权项：	1.基于免疫法分选ApoE蛋白的微流控芯片，其特征在于：由基片和盖片夹持构成独立的腔体分别为样本池、缓冲液池、捕获区和废液池，由基片和盖片夹持构成独立的通道，其中三个通道一端分别连通样本池、缓冲液池和捕获区的一端，所述三个通道的另一端交汇连通，所述捕获区的另一端通过通道连通废液池，所述捕获区沿液体流动方向依次设有至少一个矩形捕获槽，每个所述矩形捕获槽底部密布圆形槽孔，每个所述矩形捕获槽的圆形槽孔内包埋有ApoE蛋白构型的抗体，所述盖片位于样本池、缓冲液池和捕获区处设有加样口，缓冲液加样口和观测口。 2.根据权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于：所述捕获区位于样本池、缓冲液池、废液池的中间位置，所有通道构成Y型结构。 3.根据权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于：所述通道以及样本池、缓冲液池、废液池、捕获区均由基板上的凹陷结构构成，所述盖片为封盖在基板上的平板，所述基片和盖片的材质为PDMS，所述盖片的观测口通过透明玻璃密封。 4.根据权利要求1、2或3所述的微流控芯片，其特征在于：所述捕获区两端分别通过喇叭口状结构的上三角形区域和下三角形区域连通通道，所述喇叭口状结构均朝向捕获区开口逐渐变大，朝向通道开口逐渐变小。 5.根据权利要求4所述的微流控芯片，其特征在于：所述捕获区沿液体流动方向依次设有三个矩形捕获槽，三个所述矩形捕获槽内分别包埋有ApoE蛋白三种不同构型的抗体。 6.根据权利要求5所述的微流控芯片，其特征在于：三个所述矩形捕获槽分别包埋有ApoE2，ApoE3，ApoE4蛋白相应的抗体。 7.根据权利要求1或6所述的微流控芯片，其特征在于：所述通道以及样本池、缓冲液池、废液池、捕获区的凹陷结构构成深度相同，所述捕获区长度为5-7mm，宽度为2-4mm，所述圆形槽孔的孔径为8-12μm，所述三个通道中连通样本池和缓冲液池的两个通道长度相同为6-10mm，另一个通道的长度为8-12mm。 8.基于权利要求1-7中任一项所述微流控芯片的分选方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、血液样本处理；步骤2、将处理的血液样本加入样本池，之后将缓冲液加入缓冲液池，最后向将缓冲液池加入荧光标记的第二抗体；步骤3、在观测口观察荧光显色区域判断ApoE蛋白的类型。 9.根据权利要求8所述的分选方法，其特征在于：所述步骤1将血液样本中加入EDTA进行抗凝处理，之后通过离心处理取出上清液作为样本。 10.根据权利要求8或9所述的分选方法，其特征在于：所述步骤2，将步骤1收集到的上清液以6-9ul/min的速度从样本池进样，待上清液流入捕获区ApoE蛋白在捕获区与包埋的抗体相结合，之后从缓冲液池以6-9ul/min的速度加入缓冲液，冲洗捕获区表面残留物质，再从缓冲液池以5-7ul/min的速度加入荧光标记的第二抗体，待标记的第二抗体在捕获区与第一抗体结合，最后从缓冲液池加入缓冲液充分冲洗捕获区。
所属类别：	发明专利