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原文传递一种快速检测白细胞毒素的方法

专利名称：	一种快速检测白细胞毒素的方法
摘要：	本发明公开了一种快速检测白细胞毒素的方法，包括如下步骤：步骤1：对照样品的准备：制备白细胞毒素溶液，对白细胞毒素溶液进行分离纯化，得到高纯度白细胞毒素对照样品；步骤2：用乙腈将食品样品溶解，过滤后注入进样瓶，然后将对照样品和样瓶中的食品样品均进行UPLC‑q TOF MS检测；步骤3：色谱条件：采用ACQUITY‑UPLC‑BEH C18，2.1×100mm，1.7μm的色谱柱，柱温：30‑50℃，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，进行梯度洗脱，梯度洗脱的方式为：0‑2min，25％流动相A；2‑6min，25‑15％流动相A；6‑8min，15‑10％流动相A；8‑8.5min，10‑25％流动相A；8.5‑10min，25％流动相A；流速0.3mL/min。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	杨凌职业技术学院
发明人：	高冬梅
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201910219615.6
公开号：	CN109884210A
代理机构：	成都弘毅天承知识产权代理有限公司
代理人：	刘东
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	712100 陕西省咸阳市杨凌示范区渭惠路24号
主权项：	1.一种快速检测白细胞毒素的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：对照样品的准备：制备白细胞毒素溶液，对白细胞毒素溶液进行分离纯化，得到高纯度白细胞毒素对照样品；步骤2：质谱条件：Waters Xevo G2q TOF系统，采用ESI离子源负离子模式，分辨模式，用甲酸钠矫正质量轴，用亮氨酸脑啡肽，作为标准物质进行实时矫正，氩气作为碰撞气体，碰撞梯度1.9，毛细管电压2.5kV，脱溶剂温度350-450℃，脱溶剂气流量500-700L/Hr，离子源温度100-140℃；步骤3：色谱条件：采用ACQUITY-UPLC-BEH C18，2.1×100mm，1.7μm的色谱柱，柱温：30-50℃，以0.1％甲酸水溶液为流动相A，含0.1％甲酸的乙腈溶液为流动相B，进行梯度洗脱，梯度洗脱的方式为：0-2min，25％流动相A；2-6min，25-15％流动相A；6-8min，15-10％流动相A；8-8.5min，10-25％流动相A；8.5-10min，25％流动相A；流速0.1-0.3mL/min；步骤4：用乙腈将食品样品溶解，过滤后注入进样瓶，然后对食品样品和对照样品均进行UPLC-q TOF MS检测。 2.根据权利要求1所述的一种快速检测白细胞毒素的方法，其特征在于，所述步骤1中通过硅胶柱层析的方法分离纯化白细胞毒素。 3.根据权利要求1所述的一种快速检测白细胞毒素的方法，其特征在于，所述步骤1中通过高效液相色谱的方法分离纯化白细胞毒素。 4.根据权利要求1所述的一种快速检测白细胞毒素的方法，其特征在于，所述步骤1中对照样品设置为白细胞毒素二醇，先制备白细胞毒素二醇溶液然后通过制备薄层色谱的方法分离纯化白细胞毒素二醇，得到高纯度白细胞毒素二醇对照样品。 5.根据权利要求1所述的一种快速检测白细胞毒素的方法，其特征在于，所述步骤3中梯度洗脱的方式为：0-2min，60％流动相A；2-6min，60-20％流动相A；6-8min，20-10％流动相A；8-10min，10-10％流动相A；10-10.2min，10-60％流动相A。
所属类别：	发明专利