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原文传递 促进基于抗体的交换成像的组合物和方法
专利名称: 促进基于抗体的交换成像的组合物和方法
摘要: 一种用于样品中的至少两个靶标的交换成像的方法包括(a)提供至少两种或更多种靶标识别抗体,其各自与相对应的MTAB‑DM试剂结合,所述试剂能够单价结合所述靶标识别抗体;(b)将样品与所述两种或更多种靶标识别抗体一起孵育,所述抗体各自与相对应的MTAB‑DM试剂结合;(c)顺序、分批或并行施加对应于所述MTAB‑DM的至少两个成像物部分;以及(d)顺序、分批或并行地对所述至少两个成像物部分成像。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 美国;US
申请人: 乌尔蒂维尤股份有限公司
发明人: 陈曦
专利状态: 有效
申请日期: 2017-06-01T00:00:00+0800
发布日期: 2019-06-14T00:00:00+0800
申请号: CN201780047355.8
公开号: CN109891218A
代理机构: 中国国际贸易促进委员会专利商标事务所
代理人: 刘晓东
分类号: G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址: 美国马萨诸塞
主权项: 1.一种用于样品中的至少两个靶标的交换成像的方法,包括: a.提供至少两种或更多种靶标识别抗体,其各自与相对应的MTAB-DM试剂结合,所述试剂能够单价结合所述靶标识别抗体 b.将样品与所述两种或更多种靶标识别抗体一起孵育,所述抗体各自与相对应的MTAB-DM试剂结合, c.顺序、分批或并行施加与所述MTAB-DM相对应的至少两个成像物部分, d.顺序、分批或并行地对所述至少两个成像物部分成像。 2.根据权利要求1所述的方法,其中所述MTAB包括蛋白A、蛋白G、蛋白A/G、蛋白L或单价抗体片段。 3.根据权利要求1所述的方法,其中将各自与相对应的MTAB-DM试剂结合的所有所述靶标识别抗体同时与所述样品一起孵育。 4.根据权利要求1所述的方法,其中所述成像物部分分批施加,其中至少一批具有两个或更多个成像物部分,并且所述方法具有至少两个批次,并且其中所述成像发生在至少两个批次中。 5.根据权利要求1所述的方法,其中在将所述靶标识别抗体与所述样品一起孵育之前,使用过量的MTAB-DM以防止过量的游离靶标识别抗体。 6.根据权利要求1所述的方法,其中在将所述靶标识别抗体与所述样品一起孵育之前,使用超滤或凝胶过滤移除游离的MTAB-DM。 7.根据权利要求1所述的方法,其中将非特异性抗体添加至染色、洗涤和/或成像缓冲液中。 8.根据权利要求7所述的方法,其中所述非特异性抗体是来自与所述靶标识别抗体相同的宿主物种的抗体。 9.根据权利要求8所述的方法,其中所述非特异性抗体是存在于正常血清(来自未用任何靶蛋白免疫的动物)中的多克隆抗体。 10.根据权利要求8所述的方法,其中所述非特异性抗体是针对所述样品中不存在的蛋白质的单克隆抗体。 11.一种组合物,其包含: a.MTAB; b.与所述MTAB共价结合的对接部分 c.具有第一结构域和第二结构域的中间部分,其中所述第一结构域能够特异性结合所述对接部分并且其中所述第二结构域不能特异性结合所述对接部分。 12.根据权利要求11所述的组合物,其中所述MTAB为蛋白A、蛋白G、蛋白A/G、蛋白L或单价抗体片段。 13.一种制备用于交换成像的试剂的方法,其包括: a.提供MTAB; b.将所述MTAB缀合于对接部分以形成MTAB-DM; c.提供多个中间部分,其各自具有能够特异性结合所述对接部分的第一结构域和不能特异性结合所述对接部分的第二结构域; d.将所述多个中间部分与所述MTAB-DM配混。 14.根据权利要求13所述的方法,其中所述MTAB为蛋白A、蛋白G、蛋白A/G、蛋白L或单价抗体片段。 15.根据权利要求13所述的方法,其中所述多个中间部分在分批反应中与所述MTAB-DM配混。 16.根据权利要求13所述的方法,其中所述多个中间部分与所述MTAB-DM单独配混。 17.一种用于样品中的至少两个靶标的交换成像的试剂盒,其包括: a.至少两种不同的MTAB-DM试剂,其包含MTAB和能够特异性结合成像物部分的对接部分; b.任选地至少两种不同的靶标识别抗体; c.至少两个成像物部分,其用可观察部分标记且能够分别特异性结合所述MTAB-DM试剂, d.不特异性结合任何所述靶标的任选地至少一种抗体。 18.根据权利要求17所述的试剂盒,其中所述MTAB选自蛋白A、蛋白G、蛋白A/G、蛋白L或抗体的单价片段。 19.根据权利要求17所述的试剂盒,其中所述MTAB-DM能够以约1fM至1nM的亲和力结合至少两种不同的靶标识别抗体。 20.一种方法,其用于使用根据权利要求17所述的试剂进行交换成像。
所属类别: 发明专利
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