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原文传递一种分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法

专利名称：	一种分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法
摘要：	本发明公开了一种分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，首先通过乙二胺四甲叉磷酸钠与水样中的DDT形成络合物，然后对络合物依次进行富集、洗脱，最后利用荧光技术进行检测。所形成的络合物对荧光体系具有明显猝灭作用，荧光信号猝灭程度与水体中DDT的浓度具线性关系。本方法具有现场、快速，简便，灵敏的特点，解决现有技术存在的不能现场工作，分析持续时间长，分析过程繁杂，条件苛刻、能耗大，尤其是产生二次污染的问题。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省科学院海洋仪器仪表研究所
发明人：	高杨;张艳敏;高楠;刘岩;王昭玉;王茜;程岩;曹煊;孔祥峰;郭翠莲;曹璐
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910143938.1
公开号：	CN109900665A
代理机构：	青岛华慧泽专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	张慧芳
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	266200 山东省青岛市鳌山卫街道青岛蓝色硅谷核心区蓝色硅谷创业中心一期2号楼
主权项：	1.一种分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，按照以下步骤进行： (1)、水样和缓冲溶液分别在水样泵和缓冲液泵的作用下，使水样与缓冲溶液混合，保证水体体系pH维持在7.0-8.0； (2)、水样与缓冲溶液混合后的混合溶液继续在管路中流动，再与络合剂管路中的乙二胺四甲叉磷酸钠混合，在缓冲溶液提供的pH条件下，乙二胺四甲叉磷酸钠与水样中的DDT形成络合物； (3)、开启水样输送通道，水样与所形成的络合物流通三通进样阀后，进入富集柱，富集1min；富集柱内部填充由纳米金为担体的分子印迹聚合物并且具有控温装置； (4)、富集完成后，三通进样阀关闭水样输送通道，开启洗脱液通道，洗脱液在泵输送下流通富集柱，洗脱液洗脱富集在分子印迹聚合物上面的乙二胺四甲叉磷酸钠与水体中DDT螯合形成的络合物，洗脱下来的乙二胺四甲叉磷酸钠与水体中DDT螯合形成的络合物进入洗脱液中； (5)、洗脱液继续在管路中流动后，进入扁平状荧光流通池，荧光流通池的内部下面有以石墨烯为载体的荧光膜，荧光流通池上面设有可以产生激发波长450nm的激发光的激发光源，照射荧光流通池，以石墨烯为载体的荧光膜受到照射后，会产生发射波长520nm荧光；当洗脱液平流通过荧光流通池时，乙二胺四甲叉磷酸钠与水样中的DDT形成络合物对所产生的荧光信号具有猝灭效应，信号猝灭程度差值与水体中DDT的浓度具有线性关系；利用在荧光流通池上面与激发光源成90度角的光电探测装置中的光电倍增管检测所产生的荧光信号； (6)、光电倍增管对流通过的溶液所发出的荧光信号进行采集放大，并转换成电信号送入微型计算机数据处理装置，数据处理装置对得到的空白荧光猝灭程度与样品荧光猝灭程度进行计算，再根据样品荧光信号猝灭程度与空白荧光信号猝灭程度差值数据和标准样品的荧光信号猝灭程度差值数据对应关系，计算出水体中DDT的浓度。 2.根据权利要求1所述的分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，所述分子印迹聚合物的制备：在反应器中，按如下组成质量百分浓度加入，丙烯酰胺：20-30％，磷酸：5.0-10％，三乙醇胺：40-60％，乙烯基吡啶：2-5％，乙二胺四甲叉磷酸钠与水体中DDT螯合形成的络合物：2-5％，各组分含量之和为百分之百，搅拌溶解，通氮气除氧40min，在氮气保护下，加温40-50℃，搅拌反应15-20h，将得到的产物用乙醇溶液浸泡10-15h，除去模板分子，干燥，即得乙二胺四甲叉磷酸钠与水体中DDT螯合形成络合物的分子印迹聚合物。 3.根据权利要求1所述的分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，所述荧光膜的制备：在反应器中，按如下组成质量百分浓度加入，葡萄糖酸钠：20-30％，乙醇：5.0-10％，荧光素钠：40-60％，4-乙烯基苯乙烯：2-5％，各组分含量之和为百分之百，搅拌溶解，通氮气除氧30min，在氮气保护下，加温50-60℃，搅拌反应10-15h，将聚合液涂到石墨烯表面,在50℃下保持1h，成膜；该荧光膜在激发波长450nm光照射下，产生波长520nm荧光。 4.根据权利要求1所述的分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，所述的缓冲溶液为碳酸钠-碳酸氢钠溶液，流量为0.5-1.0ml/min，pH范围为7.00-8.00；所述乙二胺四甲叉磷酸钠流量为0.1-0.5ml/min，浓度为(0.5-1.0)×10-2mol/L；所述洗脱液为聚乙二醇，流量为0.1-0.3ml/min，浓度为0.01-0.03mol/L。 5.根据权利要求1所述的分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，所述的富集柱具有控温装置，富集过程中，控温在40-50℃，洗脱过程中控温在30-35℃。 6.根据权利要求1所述的分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，所述的荧光流通池具有控温装置，荧光流通池控温在20-30℃；荧光流通池厚度为5-8mm，长度50mm，宽10mm。 7.根据权利要求1所述的分子印迹选择荧光猝灭法测量水体中DDT的方法，其特征在于，泵为蠕动泵，管路采用聚四氟乙烯材料制成。
所属类别：	发明专利