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原文传递一种用于药物升白作用研究的实验动物模型的构建与评价方法

专利名称：	一种用于药物升白作用研究的实验动物模型的构建与评价方法
摘要：	本发明属实验动物模型的构建及评价方法技术领域，为解决现有用于药物升白作用研究的实验动物模型存在的精准性和专属性低的问题，提供一种用于药物升白作用研究的实验动物模型的构建及评价方法。荷瘤小鼠为实验对象给予化疗药物，得可用于药物升白作用研究的实验动物模型。代谢组学技术分析造模前后机体终端产物血清中内源性代谢产物的变化，MestReNova软件对所有1H NMR谱处理得积分数据，15个生物标志物积分均值的变化反应实验动物模型血清代谢物含量变化趋势，针对性地对本实验动物模型进行评价。综合地体现模型构建的合理性和科学性，为药理研究提供可靠的评价方法，具有高效、快速、特异性强等特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山西;14
申请人：	山西大学
发明人：	田俊生;颜磊;秦雪梅;向欢;邢婕;张丽增
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-01T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910154728.2
公开号：	CN109900870A
代理机构：	太原晋科知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	郑晋周;翟冲燕
分类号：	G01N33/15(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	030006 山西省太原市坞城路92号
主权项：	1.一种用于药物升白作用研究的实验动物模型的构建方法，其特征在于：采用18~20g的Babl/c雌性小鼠作为实验对象，腋下接种4T1乳腺癌细胞1×106/只，肿瘤生长5天，第6天腹腔注射环磷酰胺80mg/kg，之后隔日腹腔注射环磷酰胺，共注射4次，即获得用于药物升白作用研究的实验动物模型。 2.一种对权利要求1所构建的用于药物升白作用研究的实验动物模型的评价方法，其特征在于：步骤如下： (1)在实验动物模型构建的第0天和第12天分别收集动物模型的血清，首先对第0天和第12天的血清分别进行核磁共振分析，得出模型的1H NMR谱图；然后对小鼠模型的1H NMR谱图积分数据矩阵进行多元统计分析，得出模型的轮廓图； (2) 对第12天收集的模型血清进行核磁共振分析得出模型的1H NMR图谱进行积分，得出15个生物标志物的含量变化，15个生物标志物为：Glycerylphosphorylcholine、β-glucose、Glutamine、Pyruvate、Glyceride、Creatinine、Acetic acid、Betaine、α-glucose、Fructose、Lactic acid、Glutamate、Isoleucine、Unsaturated、HDL； (3)对步骤1）所得出的模型轮廓图进行分析，第12天的模型轮廓图与第0天的相比，在模型构建的第12天出现了偏离；然后，分析步骤2）得出15个生物标志物的含量变化，与第0天相比，在模型构建的第12天时的15个生物标志物的含量变化如下：若实验动物模型血清中： Glycerylphosphorylcholine的积分面积均数从正常鼠的3.253±0.45下降到2.702±0.396，P<0.05； β-glucose的积分面积均数从正常鼠的0.952±0.163下降到0.767±0.102，P<0.05； Glutamine的积分面积均数从正常鼠的0.292±0.056下降到0.192±0.035，P<0.01； Pyruvate的积分面积均数从正常鼠的0.308±0.047下降到0.208±0.070，P<0.01； Glyceride的积分面积均数从正常鼠的0.601±0.042下降到0.514±0.047，P<0.01； Creatinine的积分面积均数从正常鼠的0.242±0.034下降到0.186±0.035，P<0.01； Acetic acid的积分面积均数从正常鼠的0.150±0.015下降到0.114±0.024，P<0.01； Betaine的积分面积均数从正常鼠的0.718±0.163下降到0.555±0.073，P<0.05； α-glucose的积分面积均数从正常鼠的0.466±0.040下降到0.395±0.040，P<0.01； Fructose的积分面积均数从正常鼠的0.280±0.085下降到0.206±0.022，P<0.05； Lactic acid的积分面积均数从正常鼠的6.371±1.211上升到8.590±2.020，P<0.05； Glutamate的积分面积均数从正常鼠的0.211±0.036上升到0.298±0.046，P<0.01； Isoleucine的积分面积均数从正常鼠的0.346±0.068上升到0.437±0.094，P<0.05； Unsaturated lipid的积分面积均数从正常鼠的0.602±0.090上升到0.820±0.167，P<0.01； HDL的积分面积均数从正常鼠的0.745±0.030上升到0.828±0.093，P<0.05；则表明可用于药物升白作用研究的实验动物模型在第12天时构建成功。 3.根据权利要求2所述的一种对所构建的用于药物升白作用研究的实验动物模型的评价方法，其特征在于：步骤（2）中15个生物标志物的具体获得方法为：采用主成分分析PCA对模型的1H NMR谱图积分数据矩阵进行多元统计分析，得出模型的轮廓图，在PCA分析的基础上，利用正交偏最小二乘-判别分析发OPLS-DA对正常对照组和第12天模型血清进一步分析，得到与正常对照组对第12天模型组血清轮廓图，通过载荷图对变量加载的结果进行描述，利用变量重要性VIP分析，s-plot相关性＞0.58并结合统计学p＜0.05获得潜在的生物标志物，从对照组与模型组中找到含量变化差异显著的变量，然后对第12天收集的模型血清进行核磁共振分析得出模型的1H NMR图谱进行积分，得出15个生物标志物的含量变化。 4.根据权利要求2所述的一种对所构建的用于药物升白作用研究的实验动物模型的评价方法，其特征在于：所述模型的1H NMR谱图采用MestReNova软件进行处理得到积分数据。
所属类别：	发明专利