详情

原文传递一种校准品稳定剂、测定C肽的检测试剂盒及检测方法

专利名称：	一种校准品稳定剂、测定C肽的检测试剂盒及检测方法
摘要：	本发明属于生物医学检验技术领域，具体为一种校准品稳定剂、测定C肽检测试剂盒及检测方法。试剂盒包括校准品、试剂1、试剂2、试剂R3和试剂R4。该试剂盒利用吖啶酯标记抗C肽抗体、抗原、辣根过氧化物酶标记抗C肽抗体形成抗体‑抗原‑抗体复合物，无需洗涤过程，加入触发剂后立即连续检测一段时间，每次间隔0.02～0.05S，计算其峰面积，用已知浓度的C肽与计算出的峰面积作出剂量‑反应曲线，通过该曲线推算出待测样品的C肽含量。本发明提供的采用空间临近化学发光法检测C肽的试剂盒具有校准品稳定性强、试剂抗干扰能力强、准确度高、特异性好和线性范围宽的优点，结合仪器测量，适合各个层次的医疗和研究机构使用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州市进德生物科技有限公司
发明人：	丘传添;李民友;曾华宁;吴新伟;赵肃清;郑盛武
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-21T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201811575008.5
公开号：	CN109917134A
代理机构：	广州容大专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘新年
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510000 广东省广州市萝岗区科学城尖塔山路1号J5栋五楼
主权项：	1.一种校准品稳定剂，其特征在于，组分包括：牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、甘露醇、甘氨酸、明胶、乙二胺四乙酸二钠、酪蛋白和氯化镁；其中牛血清白蛋白：海藻糖：蔗糖：甘露醇：甘氨酸：明胶：乙二胺四乙酸二钠：酪蛋白：氯化镁的质量比为(4～6)：(2～4)：(1～3)：(0.8～1.2)：(1～3)：(0.8～1.2)：(1～3)：(2～4)：(0.8～1.2)。 2.一种校准品稳定剂的制备方法，其特征在于，包括以下操作步骤： (1)将牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、甘露醇、甘氨酸、明胶、乙二胺四乙酸二钠、酪蛋白、氯化镁加入去离子水中混匀至完全溶解，过滤；在37℃放置10～12小时，得到混合液A； (2)在混合液A中加入甘油，常温下搅拌30～40分钟，所述混合液A和甘油的体积比为1：1；冻干后收集粉末，即得标准品稳定剂。 3.一种测定C肽的检测试剂盒，其特征在于，包括校准品、试剂R1、试剂R2、试剂R3和试剂R4；所述校准品包含组分及终浓度为： C肽抗原 0.2ng/mL～20ng/mL、缓冲液 5～100mmol/L、校准品稳定剂 0.01～1w/v％；所述校准品稳定剂为权利要求1所述的标准品稳定剂或权利要求2所述的制备方法制得的标准品稳定剂；所述试剂R1的组分及终浓度为：所述试剂R2的组分及终浓度为：试剂R3的组分及终浓度为：抗氧化剂 0.01～1w/v％、稳定剂3 0.01～1w/v％；所述试剂R4的组分及终浓度为：触发剂 5～20mmol/L、稳定剂4 0.01～1w/v％、增强剂4 0.01～1w/v％。 4.根据权利要求3所述的测定C肽的试剂盒，其特征在于，所述试剂校准品、试剂R1或试剂R2中缓冲液分别为磷酸盐缓冲液、Tris缓冲液、醋酸缓冲液或HEPES缓冲液中的一种或几种；所述缓冲液pH均为6.5～8.5。 5.根据权利要求3所述的测定C肽的试剂盒，其特征在于，所述稳定剂1、稳定剂2、稳定剂3或稳定剂4分别为牛血清白蛋白、海藻糖、蔗糖、甘露醇、甘氨酸中的一种或几种。 6.根据权利要求3所述的测定C肽的试剂盒，其特征在于，所述增强剂1或增强剂2分别选自PEG4000、PEG6000、PEG8000或PEG20000的一种或几种；所述试剂R4中增强剂4为对羟基肉桂酸及其衍生物的一种或几种。 7.根据权利要求3所述的测定C肽的试剂盒，其特征在于，所述试剂R3中抗氧化剂选自抗坏血酸及其衍生物、原花青素、维生素E的一种或几种。 8.根据权利要求3所述的测定C肽的试剂盒，其特征在于，所述试剂R4中触发剂选自过氧化氢或过氧化脲中的一种或几种。 9.一种化学发光法测定C肽的方法，其特征在于，具体操作方法包括： (1)、分别获得样本和校准品的峰面积； (2)、以校准品的C肽浓度作为X坐标，以峰面积作为Y坐标，作出剂量-反应曲线，根据该曲线计算出样品中C肽的浓度。 10.根据权利要求12所述的化学发光法测定C肽的方法，其特征在于，所述步骤(1)操作为：按样本/校准品：试剂R1：试剂R2：试剂R3：试剂R4＝2：5～8：5～8：1：12～15的比例加入试剂，孵育，再加入试剂R3，混匀，加入试剂R4，立即连续检测1S内发光值RLU，每次间隔0.02～0.05S，分别计算得到样本和校准品的峰面积。
所属类别：	发明专利