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原文传递一种测定土壤微生物生物量碳氮含量的方法

专利名称：	一种测定土壤微生物生物量碳氮含量的方法
摘要：	本发明涉及一种测定土壤微生物生物量碳氮含量的方法，所述方法包括如下步骤：提取待测土壤样品中土壤微生物DNA；利用微量分光光度计测定所提取DNA浓度并换算为单位质量土壤微生物DNA含量；所测土壤微生物DNA含量分别乘以微生物生物量碳含量转化系数和微生物生物量氮含量转化系数，计算出土壤微生物生物量碳含量和土壤微生物生物量氮含量。本发明的方法只需要少量土壤样品提取微生物DNA，便能精确估计土壤微生物生物量碳氮含量，而且测定土壤微生物碳氮的方法省略了氯仿熏蒸处理步骤，转化系数准确可靠，提高了土壤微生物生物量碳氮含量的测定效率，且操作相对简单，安全性高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	甘肃;62
申请人：	兰州大学
发明人：	邓建明;龚海洋;胡维刚;杜洽军;侯晴晴
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910317938.9
公开号：	CN109916840A
代理机构：	重庆弘旭专利代理有限责任公司
代理人：	周韶红
分类号：	G01N21/31(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	730000 甘肃省兰州市城关区天水南路222号
主权项：	1.一种测定土壤微生物生物量碳氮含量的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1：提取待测土壤样品中土壤微生物DNA；步骤2：利用微量分光光度计测定所提取DNA浓度并换算为单位质量土壤微生物DNA含量；步骤3：所测土壤微生物DNA含量分别乘以微生物生物量碳含量转化系数Fc和微生物生物量氮含量转化系数Fn，计算出土壤微生物生物量碳含量和土壤微生物生物量氮含量。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤3中微生物生物量碳含量转化系数Fc为37.20，微生物生物量氮含量转化系数Fn为4.02。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤1的具体操作为：使用土壤微生物DNA提取试剂盒，从一定质量的待测土壤样品中提取土壤微生物DNA。 4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述土壤微生物DNA提取试剂盒为PowerSoil® DNA Isolation Kit试剂盒。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤2的具体操作为：利用微量分光光度计测定所提取DNA的浓度，并将所测DNA浓度换算为单位质量土壤中DNA的含量。 6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于所述微量分光光度计为NanoDropTM 2000UV-Vis spectrophotometer。 7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于所述一定质量的待测土壤样品的质量为0.2~0.5g。 8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于利用微量分光光度计测定所提取DNA浓度并换算为单位质量土壤微生物DNA含量的方法为：NanoDropTM 2000 UV-Visspectrophotometer所测DNA浓度单位为ng/μl，将此单位换算为单位质量土壤中所含DNA的量，其单位为μg/g，具体方法是将DNA浓度乘以最终提取的DNA体积再除以土壤的质量，即为单位质量土壤微生物DNA含量。 9.一种计算微生物生物量碳含量转化系数Fc和微生物生物量氮含量转化系数Fn的方法，所述方法包括如下步骤：步骤1：收集微生物收集陆地生态系统的土壤样品并细分为不同的微生境；步骤2：建立DNA含量与土壤微生物生物量碳和生物量氮的回归方程 1）提取微生物：提取微生境中土壤微生物DNA； 2）测量土壤微生物DNA浓度：用微量分光光度计测量土壤微生物DNA浓度，并将所测DNA浓度单位ng/μl换算为μg/g，用DNA浓度乘以最终提取的DNA体积，再除以土壤的质量，得到单位质量土壤微生物DNA含量； 3）建立回归方程：计算微生境中单位质量土壤微生物DNA含量的平均值，然后用传统氯仿熏蒸浸提法测定土壤微生物生物量碳氮含量的平均值，分别建立单位质量土壤微生物DNA含量的平均值与土壤微生物生物量碳氮含量的平均值的回归方程，使用最小二乘法，建立土壤微生物DNA含量和微生物生物量碳氮含量的回归方程，当单位质量土壤微生物DNA含量与实测土壤微生物生物量碳氮含量显著正相关时，将方程的回归斜率作为土壤微生物DNA含量转化为微生物生物量碳含量转化系数Fc和微生物生物量氮含量转化系数Fn；步骤3：验证转化系数的准确性和可靠性在所有土壤样品的数据中，拟合DNA浓度乘以转化系数计算得到微生物生物量碳氮含量数据，微生物生物量碳氮含量通过如下公式计算：微生物生物量碳含量=Fc×单位质量土壤微生物DNA含量微生物生物量氮含量=Fn×单位质量土壤微生物DNA含量利用标准主轴回归拟合微生物生物量碳氮含量实测数据和微生物生物量碳氮含量计算数据的关系，当土壤微生物生物量碳氮含量实测数据和微生物生物量碳氮含量计算数据显著正相关，则确定微生物生物量碳含量转化系数Fc和微生物生物量氮含量转化系数Fn合格。 10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于陆地生态系统为3-8个，微生境的数量为20-30个，陆地生态系统为荒漠、农田、草地、草甸和森林中的多种。
所属类别：	发明专利