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一种鸟苷四磷酸的超高效液相色谱检测方法
| 专利名称： | 一种鸟苷四磷酸的超高效液相色谱检测方法 |
| 摘要： | 本发明公开了属于化学分析技术领域的一种鸟苷四磷酸的超高效液相色谱检测方法。所述方法包括，采用如下色谱条件：色谱柱：反相C18色谱柱；流动相：包括流动相A与流动相B；所述流动相A为甲醇或乙腈，所述流动相B为KH2PO4溶液或K2HPO4‑KH2PO4缓冲液；洗脱条件为：流动相A：流动相B＝3～10：97～90。本发明的方法能有效检测到ppGpp，基线平稳，进样量少，节约时间和成本，不需设置梯度洗脱，操作简单方便，检测效果好。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 中国农业大学 |
| 发明人： | 罗来鑫;白凯红;蒋娜;李健强;曹永松 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-08-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-06-25T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810994060.8 |
| 公开号： | CN109932439A |
| 代理机构： | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 陈波 |
| 分类号： | G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 100193 北京市海淀区圆明园西路2号 |
| 主权项： | 1.一种鸟苷四磷酸的超高效液相色谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤，采用如下色谱条件： 色谱柱：反相C18色谱柱； 流动相：包括流动相A与流动相B； 所述流动相A为甲醇或乙腈，所述流动相B为KH2PO4溶液或K2HPO4-KH2PO4缓冲液； 洗脱条件为：流动相A：流动相B＝3-10：90-97。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述KH2PO4溶液或K2HPO4-KH2PO4缓冲液含有正四丁基溴化铵。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述KH2PO4溶液的浓度为0.1-0.2mol/L；所述K2HPO4-KH2PO4缓冲液的浓度为0.025-0.15mol/L。 4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述正四丁基溴化铵的浓度为2.5～12mmol/L。 5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述正四丁基溴化铵的浓度为5～10mmol/L。 6.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，色谱条件还包括：检测器为DAD检测器，检测波长为250～260nm。 7.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，色谱条件还包括：柱温控制为25～37℃。 8.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，色谱条件还包括：进样量为5～20μL，流速为0.1～0.4mL/min。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述色谱柱柱长为150mm。 10.根据权利要求1-9任一项所述的方法，其特征在于，包括步骤如下： (1)制备一系列浓度梯度的鸟苷四磷酸标准品，按色谱条件，进行超高效液相色谱检测，根据不同浓度标准品的色谱图数据，绘制峰面积与浓度的相关标准曲线； (2)制备检测样品，超高效液相色谱检测，得到峰面积，根据峰面积，利用标准曲线，计算得到检测样品的浓度。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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