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原文传递一种玉米根际分泌物的收集方法

专利名称：	一种玉米根际分泌物的收集方法
摘要：	本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种玉米根际分泌物的收集方法。收集方法采用以下步骤：在培养皿中放置两层滤纸并用无菌蒸馏水打湿；将预处理后的玉米种子置于培养皿中预发芽；待种子发芽后，将长势一致的玉米幼芽移至装有培养液的水培容器中培养，保证根部完好无受损；长至四叶期，在光照期开始2h后，将营养液替换为无菌蒸馏水，6h后移至超净工作台中收集根际分泌物。本实验方法收集的根际分泌物非常成功，实验中无需将玉米幼苗移出培养装置，有效避免了对玉米根系的损害，进而保证了实验结果的准确性；严格消毒、灭菌，频换更换营养液，避免了幼苗染菌及微生物污染等。较先前的培养收集方法具有高效、精准的优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	济南大学
发明人：	李慧;高幸幸;朱建堂;夏信瑶;何林林
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201910222390.X
公开号：	CN109932229A
代理机构：	济南泉城专利商标事务所
代理人：	孔娟
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	250022 山东省济南市市中区南辛庄西路336号
主权项：	1.一种玉米根际分泌物的收集方法，其特征在于，采用以下步骤：（1）.在培养皿中放置两层滤纸并用无菌蒸馏水打湿；（2）.将预处理后的玉米种子置于培养皿中预发芽；（3）.待种子发芽后，将长势一致的玉米幼芽移至装有培养液的水培容器（底面积为9.6cm2，高为12cm）中培养，保证根部完好无受损；（4）.长至四叶期，在光照期开始2h后，将营养液替换为无菌蒸馏水，6h后移至超净工作台中收集根际分泌物。 2.根据权利要求1所述的收集方法，其特征在于，步骤（1）所述培养皿底面积为9.0-10.0cm2，高为11-13cm；所述水培培养皿体积体系为100ml；每个培养皿中培养2株玉米幼苗。 3.根据权利要求1所述的收集方法，其特征在于，步骤（2）所述的预处理后的玉米种子的预处理方法为：将玉米种子置于 96％乙醇中摇动3min，3％次氯酸钠溶液中摇动30 min，无菌蒸馏水中漂洗两次，无菌蒸馏水中25℃下浸泡4 h。 4.根据权利要求1所述的收集方法，其特征在于，步骤（2）所述的预发芽为在28℃，黑暗处理至种子发芽。 5.根据权利要求1所述的收集方法，其特征在于，步骤（4）所述的水培装置中培养的具体条件为：每隔一天换一次营养液，在黑暗状态下20℃下培养8h，然后在光照状态下25℃下培养16 h，黑暗状态和光照状态交替培养。 6.根据权利要求1所述的收集方法，其特征在于，步骤（4）所述的收集根际分泌物的方法为：用注射器吸取培养皿中的液体，过0.45um膜，分装至一次性培养皿中，-80℃存放，冷冻干燥至粉末状态。 7.根据权利要求1-6所述的收集方法，其特征在于，所述营养液为Hoagland’s培养液。
所属类别：	发明专利