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原文传递超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法

专利名称：	超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法
摘要：	本发明涉及一种花生中黄曲霉毒素和农药残留的检测方法，尤其涉及一种超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法，其属于分析化学领域。一种超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中4种黄曲霉毒素和11种农药残留的方法，运用高效液相色谱－四级杆－静电场轨道阱高分辨质谱测定花生中黄曲霉毒素和农药残留，样品经乙酸‑乙腈‑水提取液提取、PSA与C18硅胶混合体系净化，正离子模式下使用含0.1％甲酸的水溶液和甲醇为流动相梯度洗脱，高分辨质谱定性定量检测。该方法准确高效，重现性好，可实现对花生中4种黄曲霉毒素和11种农药残留的同时测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	烟台出入境检验检疫局检验检疫技术中心
发明人：	胡巧茹;曹鹏;丛中笑;梁君妮;沙美兰;李晓玉;尹大路;于杰
专利状态：	有效
申请日期：	2018-08-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-25T00:00:00+0800
申请号：	CN201810911450.4
公开号：	CN109932467A
代理机构：	青岛发思特专利商标代理有限公司
代理人：	耿霞
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	264000 山东省烟台市芝罘区北马路66号中国海关烟台出入境检验检疫局
主权项：	1.一种超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法，其特征在于，步骤如下：(1)4种黄曲霉毒素和11种农药残留标准品的准备，(2)花生样品处理，(3)液相色谱检测条件:UltiMate 3000快速液相色谱仪，Thermo Hypersil GoldC18柱(100mm×2.1mm，1.9μm)；柱温40℃；进样量10μL，流动相:A为含0.1％(体积分数)的甲酸水溶液，B为甲醇，流速:0.35mL/min，梯度洗脱条件:0～0.8min，2％B；0.8～3min，2％～24％B；3～4min，24％B；4～6min，24％～95％B；6～9min，95％B；9～9.5min，95％～2％B；9.5～12min，2％B，(4)质谱检测条件:四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱仪Q－Exactive，加热电喷雾离子源(HESI)温度为350℃；毛细管电压为3.5kV；离子传输管温度为320℃；鞘气流速为40unit，辅助气流速为10unit，Full MS/dd-ms2扫描模式:采集范围为100～600M/Z，正离子采集；一级质谱分辨率为70000FWHM，二级质谱分辨率为17500FWHM；归一化碰撞能量(NCE)为30eV、45eV、60eV，(5)绘制标准曲线，(6)回收率和精密度方法学实验。 2.根据权利要求1所述的超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法，其特征在于，4种黄曲霉毒素和11种农药残留标准品的准备：配置混合标准溶液Ⅰ和混合标准溶液Ⅱ，混合标准溶液Ⅰ包括黄曲霉毒素B1(AFB1)、黄曲霉毒素G1(AFG1)、啶虫眯、乙草胺、多菌灵、克百威、毒死蜱、苯醚甲环唑、烯酰吗啉、吡虫啉、嘧霉胺、戊唑醇、噻虫，混合标准溶液Ⅱ包括黄曲霉毒素B2和黄曲霉毒素G2。 3.根据权利要求1所述的超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法，其特征在于，花生样品处理方法：样品经粉碎混匀后，准确称取2.00g样品置于聚丙烯具塞离心管中，加入10mL乙酸-乙腈-水(1:84:15，v/v/v)提取液，涡旋混匀1min，加入1.0g硫酸镁、0.3g无水乙酸钠后，立即振摇1min，4℃下以5000r/min离心5min使固液分离，转移上清液加入1.0g硫酸镁、100mg PSA与400mg C18硅胶混合体系进行分散固相萃取净化，涡旋振荡1min，然后于5000r/min离心5min，取5mL上清液于40℃水浴中氮吹至干，加入甲醇-水(50:50,v/v)定容至1ml，充分混匀后，过0.22μm滤膜，进样分析。 4.根据权利要求2所述的超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法，其特征在于，绘制标准曲线的方法：采用空白的花生基质溶液，准确配制浓度分别为1μg/L、2μg/L、5μg/L、10μg/L、20μg/L的混合标准溶液Ⅰ和浓度分别为0.25μg/L、0.5μg/L、1.25μg/L、2.5μg/L、5.0μg/L的混合标准溶液Ⅱ，经高分辨质谱检测，以色谱峰面积(Y)为纵坐标，对照溶液的质量浓度(X，μg/L)为横坐标绘制标准曲线，以各目标物在线性范围中满足回收率值在60％～120％区间内的最低浓度为方法的定量限。 5.根据权利要求2所述的超高效液相色谱－四级杆/高分辨质谱法测定花生中黄曲霉毒素和农药残留的方法，其特征在于，回收率和精密度方法学实验：取空白花生样品，分别添加1μg/kg、2μg/kg、10μg/kg三个不同浓度水平的混合标准溶液Ⅰ，分别添加0.25μg/kg、0.5μg/kg、2.5μg/kg三个不同浓度水平的混合标准溶液Ⅱ，按步骤(3)和(4)检测条件测定，每个水平重复测定6次，计算其回收率和相对标准偏差(RSD)，15种目标化合物的回收率为79.40％～119.8％，RSD为4.16～10.23％。
所属类别：	发明专利