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原文传递一种用于CTC高通量单细胞表型分析的微流控装置

专利名称：	一种用于CTC高通量单细胞表型分析的微流控装置
摘要：	本公开涉及微流控芯片检测技术领域，具体涉及一种用于CTCs分选、富集及单细胞分析的微流控装置。针对样品中CTCs中细胞浓度低、细胞表型高度差异及单细胞分析通量低和非系统自动化等因素，导致CTC表型分析难以临床应用的技术问题，本公开提供了一种对CTCs快速分选及高通量单细胞分析的微流控芯片装置，通过螺旋芯片及微柱阵列侧向流芯片完成对肿瘤细胞的分选、富集，经EpCAM和N‑cad标记后再次经微柱阵列芯片进行表型分析检测。对CTCs的操作全部在微纳尺度平台操作，最大程度的减少了CTCs丢失，具有集成度高、通量高、操作集成便捷、自动化的优势，是一种方便快捷、易于临床转化的液体活检新方法与新技术。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东师范大学
发明人：	唐波;李璐;裴海盟;司海滨
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910142378.8
公开号：	CN109946230A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	张晓鹏
分类号：	G01N21/01(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	250014 山东省济南市历下区文化东路88号
主权项：	1.一种用于CTCs快速分选和连续在线单细胞分析的集成的微流控芯片装置，其特征在于，所述装置依次设置分选和富集芯片、气泵管、第二侧向流芯片顺序设置，顺序连接；其中，所述气泵管为培养管，用于收集CTCs加入探针孵育；优选的，所述气泵管为具有两个通孔的培养管，其中一个通孔用于连接气泵使气泵中的气体进入培养管，另一个通孔与第二侧向流芯片连通使管中的样本进入第二侧向流芯片。 2.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述螺旋流道为单螺旋，具有若干螺旋的矩形通道、位于螺旋通道中心的入口及通道末端的出口；所述入口为两个，分别为第一入口和第二入口，所述出口为两个，分别为第三出口及废液出口；优选的，所述螺旋圆形通道的完整螺旋数为2～4。 3.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述第一侧向流单元为微柱阵列结构的侧向流芯片，具有两个入口及两个出口，分别为第四入口及第五入口、第六出口及第七出口；所述第三出口及第四入口直接连通；所述微柱阵列中微柱为圆柱形结构，水平截面圆形的直径为25～35μm；所述微柱阵列中微柱之间呈固定间距排列，各微柱在竖直方向的间距为25～35μm，水平方向间距为10～20μm；所述微柱阵列中，水平方向的每一排微柱自入口一侧向出口一侧具有一定角度的倾斜，靠近出口端微柱的最低点高于靠近入口端微柱最低点1.2～1.7μm。 4.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述第七出口与气泵管通过管路连通，或所述气泵管中具有EpCAM和N-cad探针。 5.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述第二侧向流芯片单元为微柱阵列结构的侧向流芯片，具有两个入口及两个出口，分别为第八入口及第九入口、第十出口及第十一出口；优选的，所述第二侧向流芯片微柱阵列结构与第一侧向流芯片微柱阵列结构相同；优选的，所述气泵管与第八入口连通。 6.如权利要求1所述的微流控芯片装置，其特征在于，所述用于CTCs快速分选和连续在线单细胞分析的微流控芯片装置还具有检测装置，该检测装置为激光诱导的荧光装置。 7.一种分选肿瘤细胞的方法，其特征在于，将样品加入权利要求1-6任一项所述的微流控芯片装置中；优选的，具体方法步骤如下：将样品经第二入口加入螺旋流道，分离后的CTCs样品液经第三出口直接进入第四入口进入第一侧向流芯片，待第七出口液体流出，加入气泵管中孵育一段时间后再经第八入口进入第二侧向流芯片，在第二侧向流的检测点采集单细胞信号；优选的，所述第一入口、第五入口及第九入口用于加入缓冲液；更进一步的，所述缓冲液为PBS缓冲液。 8.如权利要求7所述的分选肿瘤细胞的方法，其特征在于，所述样品以90～110uL/min的速度通入螺旋芯片的第一入口，或第七出口的液体以25～35uL/min通过气泵通入第八入口。 9.如权利要求7所述的分选肿瘤细胞的方法，其特征在于，所述缓冲液以720～780uL/min通入第二入口，或缓冲液以280～320uL/min通入第五入口，或缓冲液以80～100uL/min通入芯片第九入口。 10.如权利要求7所述的分选肿瘤细胞的方法，其特征在于，所述方法还包括收集第十出口的样品经上述检测装置进行检测。
所属类别：	发明专利