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原文传递一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统

专利名称：	一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统
摘要：	本发明公开了一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统，属于亲和色谱技术领域，其方法与测定系统如下：S1、取适量美洛昔康对照品，加甲醇制成0.25mg/mL的美洛昔康储备溶液，取适量美洛昔康储备溶液，用流动相稀释成2.5μg/mL的美洛昔康供试品溶液，待用；S2、取适量对乙酰氨基酚对照品，加甲醇制成1.2mg/mL的对乙酰氨基酚储备溶液，取适量对乙酰氨基酚储备溶液，用流动相稀释成0.45μg/mL的对乙酰氨基酚供试品溶液，待用；S3、取适量尿嘧啶对照品，本发明利用常规色谱分析方法，可测得超分子弱相互作用的动力学速率常数，在低浓度、水溶性差的药物检测方面以及超分子相互作用动力学参数的低成本、快速测定方面具有独特优势。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	李雪明
发明人：	李雪明;黄年霞;张建明
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-29T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-28T00:00:00+0800
申请号：	CN201910250026.4
公开号：	CN109946399A
代理机构：	北京华智则铭知识产权代理有限公司
代理人：	黄雪芝
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510030 广东省广州市越秀区东风东路801号大院16号413房
主权项：	1.一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统，其特征在于，所述方法与测定系统如下： S1、取适量美洛昔康对照品，加甲醇制成0.25mg/mL的美洛昔康储备溶液，取适量美洛昔康储备溶液，用流动相稀释成2.5μg/mL的美洛昔康供试品溶液，待用； S2、取适量对乙酰氨基酚对照品，加甲醇制成1.2mg/mL的对乙酰氨基酚储备溶液，取适量对乙酰氨基酚储备溶液，用流动相稀释成0.45μg/mL的对乙酰氨基酚供试品溶液，待用； S3、取适量尿嘧啶对照品，加水制成1.2mg/mL的尿嘧啶储备溶液，取适量尿嘧啶储备溶液，用流动相稀释成约0.13μg/mL的尿嘧啶供试品溶液，待用； S4、提供亲和色谱柱； S5、以美洛昔康供试品溶液为测定药物，对乙酰氨基酚供试品溶液为对照药物，尿嘧啶供试品溶液为常规不保留物质，分别于不同流速(0.3、0.4、0.5和0.6mL/min)下进样分析，采集其在亲和色谱柱上的色谱峰，采用Peakfit4.12软件，按照指数修正的高斯分布函数，对色谱峰进行拟合，所述拟合相关系数>0.99，得到保留时间和半峰宽，计算对应的塔板高度，采用Origin 8SR4软件，根据van Deemter方程，对尿嘧啶的线速度u与塔板高度HM，C的关系进行拟合，得到Bc和Csm、C+Cs和C，再根据亲和色谱柱的填料粒径dp，得到Csm，T，进而通过公式1计算得到HM，T,最后以为横坐标，HR-HM，T为纵坐标，进行线性回归，它的斜率即为 2.根据权利要求1所述的一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统，其特征在于，在S1、S2和S3中，所述流动相均为10mmol/L的醋酸铵和乙腈的混合溶液，所述醋酸铵和乙腈按重量份依次为83份和17份，所述醋酸铵的pH值为6.8，所述流动相的流速分别为0.3、0.4、0.5和0.6mL/min。 3.根据权利要求1所述的一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统，其特征在于，在S4中，所述亲和色谱柱为β-环糊精柱，所述β-环糊精柱的长宽依次是50mm、2.1mm，所述β-环糊精柱的填料粒径dp为5μm，所述亲和色谱柱进样量为5μL，且柱温为25℃。 4.根据权利要求1所述的一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统，其特征在于，在S5中，所述van Deemter为：和HM,C为实际测定中的尿嘧啶供试品溶液的塔板高度，AC和BC分别为实际测定中的尿嘧啶供试品溶液的A项与B项，Csm，C和Cs，C分别为实际测定中的尿嘧啶供试品溶液的静态流动相和固定相传质阻抗，HM,T为理论上的尿嘧啶供试品溶液的塔板高度，AT和BT分别为理论上的尿嘧啶供试品溶液的A项与B项，Csm，T为理论上的尿嘧啶供试品溶液的静态流动相传质阻。 5.根据权利要求1所述的一种基于亲和色谱测定解离速率常数的方法及测定系统，其特征在于，在S5中，所述公式1为： λ为乙酰氨基酚供试品溶液与尿嘧啶供试品溶液正常沸点摩尔体积次幂的比值。
所属类别：	发明专利