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原文传递氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备

专利名称：	氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备
摘要：	本发明公开了一种基于氧化钨（WO3）纳米花和氧化石墨烯‑金纳米粒子（GO‑AuNPs）的夹心型信号放大电化学生物传感器的制备方法，首先合成了具有良好电化学信号的花状WO3结构，该结构有大的比表面积，能够在负载更多的检测物；又在花状WO3上负载了AuNPs，进一步增加电化学信号；另外在二抗上面修饰了拥有大的比表面积和良好导电性的氧化石墨烯结构和AuNPs结构，GO‑AuNPs作为信号载体进行信号放大，显著降低了检测线，这样通过层层修饰构建成了检测前列腺抗原的电化学传感器。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	济南大学
发明人：	颜梅;苗培;张丛丛;于京华;张晶;秦成坤;李增军
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-02T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910259936.9
公开号：	CN109975377A
代理机构：	济南誉丰专利代理事务所(普通合伙企业)
代理人：	李茜
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	250022 山东省济南市市中区南辛庄西路336号
主权项：	1.氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，其特征包括以下步骤：（1）合成氧化钨（WO3）；（2）合成WO3-AuNPs；（3）合成氧化石墨烯-金纳米粒子（GO-AuNPs）；（4）合成Ab2-GO-AuNPs；（5）电化学传感器的构建；（6）夹心型信号放大生物传感器的电化学检测。 2.根据权利要求1所述氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，氧化钨（WO3），其特征是：将1.0g的WCl6溶于50 mL的无水乙醇中，在160ºC的水浴锅中加热4 h；将得到的产品自然冷却至室温后，分别用无水乙醇和超纯水洗涤三次，在60ºC下干燥12 h。 3.根据权利要求1所述氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，合成WO3-AuNPs，其特征是：将0.5 g步骤（1）合成物加入到100 mL蒸馏水中；随后，将0.66 mL1%的HAuCl4·4H2O滴入上述悬浮液中，室温下剧烈搅拌；搅拌4h后，在悬浮液中加入1.2 mL 的HAuCl4·4H2O，继续搅拌反应混合物12 h，将得到的溶液在8000rmp转速下离心处理2 min，得到WO3-AuNPs溶液。 4.根据权利要求1所述氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，合成氧化石墨烯-金纳米粒子（GO-AuNPs），其特征是：将25 mL浓度为0.48 mmol的HAuCl4溶液与1.25 mL浓度为1mg mL-1的GO悬浮液混合，在室温下搅拌30min；随后将溶液加热至80ºC，把470 L浓度为85 mmol的柠檬酸钠缓慢加入到上述溶液中，继续搅拌60 min，冷却至室温，将得到的溶液在5000rmp转速下离心处理5 min，用超纯水冲洗。 5.根据权利要求1所述氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，合成Ab2-GO-AuNPs，其特征是：将50μL浓度为20 μg mL−1的1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐与50μL浓度为10 mg mL−1的N-羟基丁二酰亚胺溶液加入到步骤（3）合成的溶液中，然后将1mL浓度为10 μg mL−1的二抗，即Ab2加入到溶液中，在4°C下孵育2 h；用pH 7.4的磷酸盐缓冲液洗涤3次去除没有复合的Ab2。 6.根据权利要求1所述氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，电化学传感器的构建，其特征是：导电玻璃为铟锡氧化物玻璃（ITO），将导电玻璃切割为4.0×0.5 cm条状，依次用丙酮溶液、二次蒸馏水和无水乙醇超声清洗5 min，然后在氮气下干燥备用；将20μL上述制备的WO3-AuNPs溶液涂在ITO电极表面，在室温下干燥，随后把6 μL浓度为10 μgmL−1的一抗即Ab1在4 ºC下孵育16 h，用pH 7.4的磷酸盐缓冲液彻底冲洗3次；继续滴涂20µL3%的牛血清白蛋白封堵非特异性结合位点，用pH 7.4的磷酸盐缓冲液彻底冲洗3次，将20 μL不同浓度前列腺抗原滴加至电极表面，室温下孵育30 min，用pH 7.4的磷酸盐缓冲液洗涤3次；继续滴加20 μL步骤（4）合成的Ab2-GO-AuNPs；随后将6 μL的浓度为0.1 mg mL-1焦碳酸二乙酯和链霉素改性碱性磷酸滴涂在电极上室温放置50 min。 7.根据权利要求1所述氧化钨和氧化石墨烯-金纳米粒子传感器的制备，夹心型信号放大生物传感器的电化学检测，其特征是：将步骤（5）处理好的修饰电极作为工作电极，对电极是铂丝电极，参比电极是Ag/AgCl电极，将1.0 mL浓度为5 mmol的磷酸抗坏血酸酯加入到100 mL的pH 7.4的磷酸盐缓冲液体系，通过脉冲伏安法进行测定。
所属类别：	发明专利