详情

原文传递一种免疫层析法检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种免疫层析法检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种免疫层析法检测试剂盒，包括反应板、PBS缓冲液、水痘病毒抗原、羊抗鼠IgG抗体、胶体金标记鼠抗人IgG单抗溶液和塑料卡，所述反应板由NC膜、玻璃纤维素膜、吸水纸以及样品垫装配而成；本发明水痘病毒抗体免疫层析法检测试剂盒具有快速、简便、准确和灵敏度高的特点，整个操作时间仅需20分钟就可判读结果，不需要辅助仪器，可直接肉眼观察结果，适用范围广，可单份检测，易于对水痘疫苗接种后效果进行评价。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏伯纳德生物科技发展有限公司
发明人：	孙伟
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910186156.6
公开号：	CN109991416A
代理机构：	北京盛凡智荣知识产权代理有限公司
代理人：	许羽冬
分类号：	G01N33/569(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	211300 江苏省南京市高淳区古柏镇双高路86-1号、-12号
主权项：	1.一种免疫层析法检测试剂盒，其特征在于，包括反应板、PBS缓冲液、水痘病毒抗原、羊抗鼠IgG抗体、胶体金标记鼠抗人IgG单抗溶液和塑料卡，所述反应板由NC膜、玻璃纤维素膜、吸水纸以及样品垫装配而成。 2.根据权利要求1所述的一种免疫层析法检测试剂盒，其特征在于：所述PBS缓冲液为0.05mol/L PH值在7.30～7.50的PBS缓冲液，按照100ml量计由Na2HPO4·12H2O 1.45g、NaH2PO4·2H2O 0.148g、NaCl 0.85g加纯化水80.00mL制得，其电导率在9000μs/cm～13000μs/cm。 3.根据权利要求1所述的一种免疫层析法检测试剂盒，其特征在于：所述胶体金标记鼠抗人IgG单抗溶液按照100mL量计采用如下步骤制得： (1)取100mL胶体金于三角瓶中，加入0.1M碳酸钾溶液1.7mL，混匀，静置10min； (2)取鼠抗人IgG单抗3mg，快速搅拌下，将鼠抗人IgG单抗逐滴加入到三角瓶中，室温静置40min； (3)取10％牛血清白蛋白溶液10mL，快速搅拌下逐滴加入到三角瓶中，室温静置15min； (4)将步骤(3)中所得溶液在10000rpm，4℃下离心30min，弃去上清液，再加入胶体金结合物稀释液至100mL，在2～8℃下保存备用，得胶体金标记鼠抗人IgG单抗溶液。 4.根据权利要求3所述的一种免疫层析法检测试剂盒，其特征在于：所述胶体金按照100mL量计由1％氯金酸溶液1mL、1％柠檬酸三钠溶液1.4mL，其余为纯化水制得。 5.根据权利要求4所述的一种免疫层析法检测试剂盒，其特征在于：所述胶体金结合物稀释液按照100mL量计由三羟甲基氨基甲烷0.1211g、蔗糖2g、PVP-10 1g、牛血清白蛋白2g、吐温-20 0.5mL、纯化水80mL以及适量盐酸制得，pH值控制在8.6～8.8之间。 6.一种如权利要求1～5任一所述的免疫层析法检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： a)检测线包被液的制备，按10mL量计，取水痘病毒抗原10mg，加入到PBS缓冲液中并定容至10mL，充分混匀15min，使水痘病毒抗原的终浓度为1.0mg/ml即得； b)质控线包被液的制备，按10mL量计，取羊抗鼠IgG抗体20mg，加入到PBS缓冲液中，并定容至10mL，充分混匀15min，使羊抗鼠IgG抗体的终浓度为2.0mg/mL即得； c)用金标划线机将步骤a)与步骤b)中所得的两种包被液划到NC膜上并干燥，得划线NC膜； d)用胶体金标记鼠抗人IgG单抗溶液按60μl/m2浸泡涂抹玻璃纤维素膜制成金标垫，干燥后保存备用； e)将划线NC膜、金标垫、吸水纸、样品垫整装后用切条机切成4mm的试纸条，并装入塑料卡中得试剂卡，将试剂卡装入铝箔袋后装盒即得试剂盒。
所属类别：	发明专利