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原文传递一种流式细胞仪液路系统及其检测方法

专利名称：	一种流式细胞仪液路系统及其检测方法
摘要：	本发明公开了一种流式细胞仪液路系统及其检测方法，所述液路系统包括鞘液供给单元、样本吸推单元、流动室和清洗回收单元，检测方法则采用上述流式细胞仪液路系统进行流式细胞检测。本发明以泵推式液路系统为基础，搭配泵阀及其他液流器件实现了稳定的液路环境、精确的液体流量控制、大容量的样本测试和持续性的鞘液供给，能够提供良好的连续测试条件。通过本设计，可以实现体积法绝对计数。并且，本发明的液路系统具有简单的液路器件构成，需要外接的液路器件只有鞘液储存子单元和废液储存子单元，维护简单。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	重庆博奥新景医学科技有限公司
发明人：	赵松;张冠斌;赖伟;李毅
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910409298.4
公开号：	CN110031386A
代理机构：	成都九鼎天元知识产权代理有限公司
代理人：	钟莹洁
分类号：	G01N15/14(2006.01);G;G01;G01N;G01N15
申请人地址：	400714 重庆市北碚区京东方大道399号27幢、28幢、29幢
主权项：	1.一种流式细胞仪液路系统，其特征在于，所述液路系统包括鞘液供给单元、样本吸推单元、流动室和清洗回收单元；所述鞘液供给单元包括鞘液吸取阀、双路鞘液蠕动泵、鞘液分配阀、鞘液过滤阀和鞘液加注阀，鞘液吸取阀的入口通过鞘液供给管路与鞘液储存子单元相连并且鞘液吸取阀的出口分别与双路鞘液蠕动泵的两个入口相连，双路鞘液蠕动泵的第一出口依次通过鞘液过滤阀、鞘液加注阀与流动室的鞘液注入口相连，双路鞘液蠕动泵的第二出口与鞘液分配阀的入口相连，所述鞘液分配阀为具有两个出口的三通阀并且鞘液分配阀的第二出口与所述鞘液过滤阀的入口相连；所述样本吸推单元包括进样泵子单元、推样子单元和吸样子单元，进样泵子单元包括选择阀和进样泵，选择阀具有能够两两连通的三个阀头，其中，鞘液过滤阀的出口还与选择阀的第一阀头相连，选择阀的第三阀头通过样本吸推管路分别与推样子单元和吸样子单元相连并且选择阀的第二阀头与进样泵相连，所述第一阀头与第二阀头连通建立鞘液通道且第二阀头与第三阀头连通建立样本通道；所述推样子单元与流动室的样本注入口相连，所述吸样子单元与样本管或清洗管相连；所述清洗回收单元包括拭子、排空阀、清洗阀和废液泵，拭子设置在吸样子单元外围，流动室的排空口通过排空阀与废液泵相连并且拭子通过清洗阀与废液泵相连，废液泵与废液储存子单元相连并且流动室的废液排出口通过废液排出管路也与废液储存子单元相连，所述鞘液分配阀的第一出口通过拭子清洗管路与拭子相连。 2.根据权利要求1所述的流式细胞仪液路系统，其特征在于，所述鞘液供给单元还包括设置在鞘液过滤阀与鞘液加注阀之间的过滤稳流器，所述过滤稳流器的出口分别与鞘液加注阀的入口和选择阀的第一阀头相连。 3.根据权利要求1所述的流式细胞仪液路系统，其特征在于，当鞘液分配阀通电时，鞘液分配阀的入口与第二出口连通；当鞘液分配阀断电时，鞘液分配阀的入口与第一出口连通。 4.根据权利要求1所述的流式细胞仪液路系统，其特征在于，所述推样子单元包括推样阀和推样针，所述推样针通过流动室的样本注入口伸入流动室中，推样阀的入口与样本吸推管路相连且出口与推样针相连；吸样子单元包括吸样阀和上样针，吸样阀的出口与样本吸推管路相连且入口与上样针相连，所述上样针能够插入样本管或清洗管中；其中，所述推样阀和吸样阀均为夹管阀。 5.根据权利要求1所述的流式细胞仪液路系统，其特征在于，所述拭子设置在上样针外围并用于清洗上样针，所述拭子具有清洗入口和清洗出口，拭子的清洗入口通过拭子清洗管路与鞘液分配阀的第一出口相连且清洗出口与清洗阀相连。 6.根据权利要求1所述的流式细胞仪液路系统，其特征在于，所述进样泵为推样速度可调的注射泵或柱塞泵；所述流动室的鞘液注入口和排空口同水平高度设置在流动室内部腔体下方，并且废液排空口设置在流动室的顶部、样本注入口设置在流动室的底部、检测区域设置于流动室上部，样本流和鞘液流形成的稳定层流在检测区域通过并收集相关检测数据。 7.一种流式细胞检测方法，其特征在于，采用权利要求1至6中任一项所述的流式细胞仪液路系统进行流式细胞检测，所述检测方法包括以下步骤： A、下达检测命令； B、控制鞘液供给单元输入鞘液并建立稳定的鞘流环境； C、控制选择阀建立样本通道并通过进样泵吸取样本； D、控制清洗回收单元抽吸鞘液至拭子并清洗吸样子单元的上样针外壁； E、控制进样泵和推样子单元将样本推送至流动室中，在检测区域形成鞘液流包裹样本流的层流状态并收集数据； F、当人为结束检测流程时，推送剩余样本并控制进样泵复位；当样本自行推送完毕后，进样泵自动复位； G、启动检测后清洗步骤，清洗后结束检测。 8.根据权利要求7所述的流式细胞检测方法，其特征在于，所述检测后清洗步骤包括以下子步骤： a、控制鞘液分配阀和清洗回收单元建立上样针清洗环境，控制选择阀建立鞘液通道并通过进样泵抽取大量鞘液； b、控制选择阀建立样本通道，通过进样泵推送鞘液至样本吸推管路并且再分别经过推样子单元进入流动室和吸样子单元进入上样针进行清洗，随后排出废液； c、控制鞘液分配阀使鞘液全部通过鞘液加注阀进入流动室进行清洗，随后排出废液，结束检测后清洗步骤。 9.根据权利要求7所述的流式细胞检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括在所有检测完毕之后进行的浸泡清洗步骤，所述浸泡清洗步骤包括以下子步骤： A、下达浸泡清洗命令； B、控制鞘液供给单元输入鞘液填充管路，停止供给鞘液后保持液流停滞状态； C、控制选择阀建立样本通道并通过进样泵和吸样子单元吸取清洗液，随后通过进样泵和推样子单元推送清洗液至流动室中浸泡预定时间，随后排出清洗废液； D、重复步骤C的浸泡动作直至浸泡达到目标次数，进样泵复位； E、控制鞘液供给单元输入鞘液填充管路，并控制鞘液分配阀和清洗回收单元用鞘液清洗吸样子单元的上样针外壁； F、控制进样泵建立鞘液通道并抽取鞘液，再控制选择阀建立样本通道，通过进样泵推送鞘液至样本吸推管路并且再分别经过推样子单元进入推样针和吸样子单元进入上样针进行内壁清洗，随后排出废液； G、重复步骤F的清洗动作直到清洗达到目标次数，进样泵复位； H、排空流动室，逆向清洗流动室，随后控制鞘液供给单元输入鞘液填充管路，结束浸泡清洗步骤。 10.根据权利要求7所述的流式细胞检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括进样泵初始化步骤、鞘液填充步骤和排空液体步骤，其中，所述检测方法还包括体积法绝对计数功能，通过补偿参数x对体积值n进行补偿，最终计算绝对计数为m/(n*x)，其中，补偿参数x为样本流量在检测区域的丢失比例且补偿参数x＜1，m为测试粒子数，n为相同时间测试体积值。
所属类别：	发明专利