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原文传递 同型半胱氨酸浓度检测方法
专利名称: 同型半胱氨酸浓度检测方法
摘要: 本发明提供了一种同型半胱氨酸浓度检测方法,包括以下步骤:(1)除杂:将待测血清样本用去蛋白剂除杂;(2)还原:在血清样本中加入还原剂以将血清中的同型半胱氨酸还原;(3)去除蛋白:用10%的三氯乙酸(TCA)除蛋白处理;(4)分离:利用液相色谱柱实现同型半胱氨酸与杂质的色谱分离;(5)检测:经MS检测器采用内标法定量检测同型半胱氨酸的浓度。本发明方法简单,易实现自动化、批量化,过程稳定,降低检测成本和节省时间。一次性同时实现血浆中叶酸、半胱氨酸、同型半胱氨酸和蛋氨酸的检测,解决了免疫法中一次只能测定一种物质的问题。减少了采集被检测人的血量。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 浙江;33
申请人: 杭州和合医学检验实验室有限公司
发明人: 李江西
专利状态: 有效
申请日期: 2019-04-24T00:00:00+0800
发布日期: 2019-07-23T00:00:00+0800
申请号: CN201910331827.3
公开号: CN110045031A
代理机构: 南京正联知识产权代理有限公司
代理人: 卢海洋
分类号: G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址: 310051 浙江省杭州市滨江区长河街道滨安路688号4幢4层401室
主权项: 1.同型半胱氨酸浓度检测方法,其特征在于,包括以下步骤: (1)除杂:将待测血清样本用去蛋白剂除杂; (2)还原:在经过除杂处理的血清样本中加入还原剂以将血清中的同型半胱氨酸还原; (3)去除蛋白:用10%的三氯乙酸(TCA)除蛋白处理; (4)分离:利用液相色谱柱实现同型半胱氨酸与杂质的色谱分离,得到同型半胱氨酸样本的色谱图; (5)检测:经MS检测器,质荷比定性,用同位素内标,采用内标法定量检测同型半胱氨酸的浓度。 2.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸浓度检测方法,其特征在于:所述还原剂与待测血清样本的体积比为1-1.5:3,所述还原剂为巯基乙醇,所述还原剂的浓度为0.55-0.8mol/L。 3.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸浓度检测方法,其特征在于:所述液相色谱分离条件为:色谱柱为Primesep100,色谱柱柱温:50℃;进样量:10μL;流速:0.55mL/min;流动相组成:A相为0.1%甲酸-水溶液,B相为0.1%甲酸-乙腈溶液。 4.根据权利要求1所述的同型半胱氨酸浓度检测方法,其特征在于:所述质谱检测条件为:电喷雾针电压:3.0kV,去溶剂气流速:550L/h,去溶剂气温度:500℃,锥孔气流速:50L/h,检测为正离子模式。
所属类别: 发明专利
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