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原文传递同步检测二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光免疫试纸组及其制备和使用方法

专利名称：	同步检测二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光免疫试纸组及其制备和使用方法
摘要：	本发明提供一种同步检测二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光免疫试纸组及其制备和使用方法，涉及生物医药技术领域，本发明所述荧光免疫试纸组，包括定性试纸和定量试纸；定性试纸的样品垫分别设置有独立的四种毒品的荧光微球标记单克隆抗体区，检测线喷涂有四种毒品的混合物；定量试纸的样品垫设置有四种毒品混合免疫得到的多克隆抗体，NC膜上则分别喷涂四种毒品抗原作为四条定量检测线。本发明提供的荧光免疫试纸组可同时测定四种毒品，并且结合定性试纸和定量试纸后一次性实现定性和定量检测的需要，省时省力，对毒品执法的现场检测具有重大意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	石家庄洹众生物科技有限公司
发明人：	李晓春;李森
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201910275940.4
公开号：	CN110058012A
代理机构：	北京高沃律师事务所
代理人：	赵晓琳
分类号：	G01N33/533(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	050000 河北省石家庄市高新区珠江大道313号方亿科技园A区3号楼四层
主权项：	1.一种同步检测二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光免疫试纸组，其特征在于，包括定性试纸和定量试纸；所述定性试纸和定量试纸由下至上依次包括样品垫、样品结合垫、NC膜和吸水纸；所述定性试纸的样品结合垫包括独立的荧光微球标记的二乙酰吗啡单克隆抗体区、荧光微球标记的甲基苯丙胺单克隆抗体区、荧光微球标记的氯胺酮单克隆抗体区和荧光微球标记的可卡因单克隆抗体区；所述定性试纸的NC膜上设置有一条定性检测线和一条质控线，所述定性检测线为二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的混合物；所述定量试纸的样品结合垫包括二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光微球标记多克隆抗体；所述定量试纸的NC膜上设置有四条定量检测线和一条质控线，所述定量检测线包括二乙酰吗啡定量检测线、甲基苯丙胺定量检测线、氯胺酮定量检测线和可卡因定量检测线，各自喷涂有二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮或可卡因；所述二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光微球标记单克隆抗体中，标记的荧光微球各不相同。 2.根据权利要求1所述的荧光免疫试纸组，其特征在于，所述荧光微球选自稀土荧光微球、时间分辨荧光微球、二氧化硅荧光微球与单分散荧光微球中的一种或多种。 3.根据权利要求1所述的荧光免疫试纸组，其特征在于，所述定性试纸和定量试纸中，样品垫与样品结合垫有1/3长度的交叠，样品结合垫未与样品垫交叠的一端与NC膜有1/3长度的交叠，NC膜未与样品结合垫交叠的一端与吸水纸有1/3长度的交叠。 4.根据权利要求1所述的荧光免疫试纸组，其特征在于，所述质控线为IgG多克隆抗体。 5.根据权利要求1所述的荧光免疫试纸组，其特征在于，所述定性试纸中，样品结合垫上依次包括荧光微球标记的二乙酰吗啡单克隆抗体区、荧光微球标记的甲基苯丙胺单克隆抗体区、荧光微球标记的氯胺酮单克隆抗体区和荧光微球标记的可卡因单克隆抗体区。 6.根据权利要求1或5所述的荧光免疫试纸组，其特征在于，所述定量试纸中，定量检测线依次为二乙酰吗啡定量检测线、甲基苯丙胺定量检测线、氯胺酮定量检测线和可卡因定量检测线。 7.根据权利要求1所述的荧光免疫试纸组，其特征在于，所述二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光微球标记多克隆抗体，是以二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因作为抗原混合免疫得到的多克隆抗体经荧光微球标记得到的。 8.权利要求1～7任意一项所述荧光免疫试纸组的制备方法，包括以下步骤： S1、向结合垫喷涂独立的荧光微球标记的二乙酰吗啡单克隆抗体区、荧光微球标记的甲基苯丙胺单克隆抗体区、荧光微球标记的氯胺酮单克隆抗体区和荧光微球标记的可卡因单克隆抗体区，得到定性试纸的结合垫；向结合垫喷涂二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的荧光微球标记多克隆抗体，得到定量试纸的结合垫； S2、向NC膜喷涂二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的混合物作为检测线、喷涂IgG多克隆抗体作为质控线，得到定性试纸的NC膜；向NC膜分别喷涂二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因作为二乙酰吗啡定量检测线、甲基苯丙胺定量检测线、氯胺酮定量检测线和可卡因定量检测线，喷涂IgG多克隆抗体作为质控线，得到定量试纸的NC膜； S3、由下到上依次将样品垫、定性试纸的结合垫、定性试纸的NC膜以及吸水纸组装，得到定性试纸；由下到上依次将样品垫、定量试纸的结合垫、定量试纸的NC膜以及吸水纸组装，得到定量试纸； S4、将定性试纸和定量试纸组装在同一样品板上，得到荧光免疫试纸组。 9.根据权利要求8所述的制备方法，其特征在于，所述定量试纸中，各定量检测线之间的间距为0.8～2mm；所述定量试纸的定量检测线和质控线的间距不低于8mm。 10.一种同步检测二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因四种毒品的荧光免疫方法，包括如下步骤： (1)将待测样品滴加到权利要求1～7任意一项所述技术方案所述的荧光免疫试纸组中的定性试纸的样品垫，孵育后检测质控线和检测线的荧光强度，同时设置空白对照组；若定性试纸检测线的荧光信号低于空白对照且质控线有荧光信号，则判断待测样品中含有二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因中的一种或多种；若定性试纸检测线的荧光信号强度与空白对照相同且质控线有荧光信号，则判断待测样品无二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因； (2)分别绘制二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮或可卡因的浓度与其相应定量检测线的荧光强度的标准曲线； (3)将步骤(1)中判断含有二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因中一种或多种的待测样品滴加到所述定量试纸的样品垫，孵育后检测定量检测线和质控线的荧光强度，根据标准曲线计算样品中二乙酰吗啡、甲基苯丙胺、氯胺酮和可卡因的一种或多种的浓度。
所属类别：	发明专利