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原文传递一种天麻粉末的显微观察制片方法及其应用

专利名称：	一种天麻粉末的显微观察制片方法及其应用
摘要：	本发明涉及一种天麻粉末的显微观察制片方法及其应用，属于显微技术领域。本发明的天麻粉末显微制片方法包括以下步骤：(1)取天麻粗粉，加入稀盐酸后，除去稀盐酸溶解出来的白色乳浊状液体，用NaOH水溶液洗涤后再用蒸馏水洗涤；(2)加入乙醇‑甘油溶液得混悬液，吸取混悬液至载玻片上，加热挥干溶剂使天麻粗粉聚集；(3)滴加水合氯醛溶液至天麻粗粉上，加热透化；(4)滴加醋酸甘油水溶液，盖上盖玻片压平，显微镜观察拍照。本发明的天麻粉末显微制片方法，使天麻细胞在显微镜下清晰可见，易于计数细胞数目，确定天麻粉末细胞数目与质量的线性关系，准确度更高，从而更科学地计算超微粉破壁率。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州白云山汉方现代药业有限公司
发明人：	龙海林;蒋兆健;蔡鸿飞;袁诚;许文东;张懿;李康强;潘裕清;李海波;杨阳
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201811587856.8
公开号：	CN109682657A
代理机构：	广州三环专利商标代理有限公司
代理人：	颜希文;宋静娜
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	510000 广东省广州市从化温泉大道8号
主权项：	1.一种天麻粉末的显微观察制片方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)取天麻粗粉，加入稀盐酸后，过滤除去稀盐酸溶解出来的白色乳浊状液体，重复多次至加入的稀盐酸呈澄清状态，过滤除去稀盐酸，用NaOH水溶液洗涤后再用蒸馏水洗涤天麻粗粉； (2)向洗涤后的天麻粗粉中加入乙醇-甘油溶液得天麻粗粉混悬液，吸取天麻粗粉混悬液至载玻片上，同时加热挥干溶剂使天麻粗粉聚集； (3)然后滴加水合氯醛溶液至天麻粗粉上，加热透化，待细胞透化完全后用滤纸吸干剩余溶剂； (4)滴加醋酸甘油水溶液，盖上盖玻片压平，完成制片，显微镜观察拍照。 2.如权利要求1所述的显微观察制片方法，其特征在于，所述步骤(1)中，天麻粗粉的粒度为30～100目，稀盐酸的浓度为0.05～1mol/L，NaOH水溶液的浓度为0.05～1mol/L。 3.如权利要求1所述的显微观察制片方法，其特征在于，所述步骤(2)中，乙醇-甘油溶液中乙醇与甘油的体积比为(5～1)：1，天麻粗粉与乙醇-甘油溶液的质量体积比为1：(5～20)，加热方式为水浴锅加热，温度为85～95℃。 4.如权利要求1所述的显微观察制片方法，其特征在于，所述步骤(3)中，水合氯醛溶液的配制方法为：将10～50g水合氯醛晶体溶解于10mL水中，即得。 5.如权利要求1所述的显微观察制片方法，其特征在于，所述步骤(3)中，水合氯醛的用量为1～2滴，加热透化的次数为2～3次，每次1～5分钟。 6.如权利要求1所述的显微观察制片方法，其特征在于，所述步骤(3)中，加热方式为水浴锅加热，温度为85～95℃。 7.如权利要求1所述的显微观察制片方法，其特征在于，所述步骤(4)中，显微镜为光学显微镜，醋酸甘油水溶液中醋酸、甘油、水的体积比为(0.5～2)：(0.5～2):1，醋酸甘油水溶液的用量为50～150μl。 8.如权利要求1～7任一项所述的显微观察制片方法在计算天麻超微粉破壁率中的应用。 9.如权利要求8所述的应用，其特征在于，所述计算天麻超微粉破壁率还包括以下步骤： (1)显微镜观察拍照后，记录6～10个视野中薄壁细胞的数目，取薄壁细胞数目的平均值； (2)统计分析天麻薄壁细胞数目与天麻粗粉质量的线性关系方程式。 10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述步骤(2)的具体操作为：取6份不同体积的天麻粗粉混悬液，制片，显微观察记录薄壁细胞数目，获得天麻薄壁细胞数目与天麻粗粉质量的线性关系方程式。
所属类别：	发明专利